公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:喜樹堿 Camptothecin
英文名稱:Camptothecin
產(chǎn)品規(guī)格:100μl|500μl
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
英文名稱:Camptothecin 產(chǎn)品規(guī)格:100μl|500μl 濃度:1mg/mL in DMSO 分子式:C20H16N2O4 分子量:348.4 純度:>98%(TLC) 儲(chǔ)存:-20℃,有效期12個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
蘋果雙殼菌腫瘤新因子1抗體Human FAM57B ELISA Kit兔子熱休克蛋白27(HSPB1/HSP27)免疫試劑盒
亮白曲霉膽固25α7羥化抗體Human FAM65B ELISA Kit兔子缺血修飾白蛋白(IMA)免疫試劑盒
雷夫松氏菌角蛋白3+12抗體Human FAM175A ELISA Kit兔子橋粒糖蛋白2(DSC2)免疫試劑盒
白酒 酒精度接頭蛋白CrkL抗體Human FAM71F2 ELISA Kit兔子前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
桔綠木霉色P450 24A1抗體Human FAM71E2 ELISA Kit兔子前列腺E1(PGE1)免疫試劑盒
線蟲被毛孢色P450 2R1抗體Human FAM185A ELISA Kit兔子前列腺A2 免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體Human FAM175A ELISA Kit兔子前列腺A1 免疫試劑盒
紫紅曲霉鈣周期結(jié)合蛋白抗體Human FAM71E2 ELISA Kit兔子前白蛋白(PA)免疫試劑盒
釀酒酵母7號(hào)染色體開放閱讀框69抗體Human FAM72A ELISA Kit兔子葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)免疫試劑盒
塔賓曲霉銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體Human FAM185A ELISA Kit兔子皮質(zhì)(CORT)免疫試劑盒
釀酒酵母19號(hào)染色體開放閱讀框71抗體Human FAM186B ELISA Kit兔子皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒
pAAV-RC2異染色體同源蛋白1抗體Human FAM71F2 ELISA Kit兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒
蕈狀芽孢桿菌銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Human FAM124B ELISA Kit兔子黏多糖/糖聚糖免疫試劑盒
光黑腹菌霉抗體Human FAM127A ELISA Kit兔子腦鈉(BNP)免疫試劑盒
蜂房哈夫尼菌4號(hào)染色體開放閱讀款Human FAM127B ELISA Kit兔子內(nèi)皮抑(ES)免疫試劑盒
草木樨中華根瘤菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體Human FAM129A ELISA Kit兔子內(nèi)皮1(ET-1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTU3A蛋白試劑盒牛膝甾
哈茨木霉Trichoderma│harzianum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTrem樣轉(zhuǎn)錄因子1試劑盒尿苷
核盤菌Sclerotinia│sclerotiorum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTraf2結(jié)合蛋白試劑盒尿嘧啶
喜樹堿 Camptothecin鏈霉 1,4-二溴-2,5-二苯彈性蛋白Elisa
煙色離褶傘 3-氟-5-苯蛋白CElisa
白被黑蛋巢 二苯基三氟磺酸鹽蛋白C抑制物Elisa
芽孢桿 n-BOC-1,6-二氨基己烷鹽酸鹽蛋白SElisa
柯氏黑蛋巢 2,4-二苯(基)硫脲蛋白激AElisa
棒曲霉 2-溴-4-硝基咪唑蛋白激BElisa
大腸埃希 吡唑并[1,5-a]吡啶-2-羧酸蛋白激CElisa
尖孢鐮刀 3,4-二氟苯乙蛋白聚糖Elisa
釀酒酵母 2-溴-6-氟苯低分子肝Elisa
pBBRMCS-2 3,4-二氟低分子量激肽原Elisa
動(dòng)物雙歧桿 5-氨基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯低密度脂蛋白Elisa
華美鏈霉 6-甲氧基-3-吡啶甲低密度脂蛋白膽固Elisa
芽孢桿 2,4-二吡咯并[3,2-d]嘧啶低密度脂蛋白受體Elisa
立枯絲核(測(cè)序正確) 3',4'-二苯酮低氧誘導(dǎo)因子-1αElisa
絨毛栓 2,6-二苯磺酰低氧誘導(dǎo)因子-2αElisa