商品介紹:
GNE-617是新型特異的Nampt抑制劑,在A(yíng)549細(xì)胞中IC50為18.9nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1362154-70-8 純度:99.46% 分子式:C??H??F?N?O?S 分子量:427.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):Nampt抑制劑(GNE-617)
英文名稱(chēng):GNE-617
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
巨大芽孢桿菌氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白KCC4抗體Human PRKX ELISA Kit血影蛋白(spectrin)ELISA Kit
解淀粉芽孢桿菌磷化離子通道蛋白Kv1.3抗體Human Presenilin-1 ELISA Kit血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA Kit
雞油菌離子通道蛋白家族成員4抗體Human PREPL ELISA Kit血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)ELISA Kit
熒光假單胞菌電壓門(mén)控性通道蛋白亞基kv5.1抗體Human PREP(Prolyl endopeptidase) ELISA Kit血小板源性生長(zhǎng)因子D(PDGF-D)ELISA Kit
蘑菇輪枝孢電壓門(mén)控性通道蛋白亞基kv6.1抗體Human PPT2 ELISA Kit血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit
大腸埃希氏菌電壓門(mén)控性通道蛋白亞基KV6.3抗體Human PRH1 ELISA Kit血小板因子4(PF4)ELISA Kit
弗雷德里克斯堡假單胞菌磷化內(nèi)流通道蛋白KCNJ1抗體Human PRIC285 ELISA Kit血小板因子3(PF-3)ELISA Kit
棲稻假單胞菌鈣激活通道蛋白KCNT2抗體Human PPWD1 ELISA Kit血小板衍生生長(zhǎng)因子CC(PDGF-CC)ELISA Kit
白僵菌內(nèi)流通道蛋白Kir5.1抗體Human PQBP1 ELISA Kit血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA Kit
好食脈孢菌磷化內(nèi)流通道蛋白Kir5.1抗體Human PRICKLE1 ELISA Kit血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)ELISA Kit
厚垣普奇尼亞菌*磷化ATP敏感性通道亞基kir6.2抗體Human PRICKLE3 ELISA Kit血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA Kit
卷枝毛霉原變型電壓門(mén)控通道蛋白KVβ.2抗體Human PRAM1 ELISA Kit血小板衍化生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA Kit
谷棒桿菌電壓門(mén)控性通道蛋白Kv1.4抗體Human CSNK2A1(Casein kinase II subunit alpha) ELISA Kit血小板衍化生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA Kit
黃柄曲霉電壓門(mén)控性通道Kv1.6抗體Human PRKAA2(5′-AMP-activated protein kinase catalytic subunit alpha-2) ELISA Kit血小板型磷果糖激(PFKP)ELISA Kit
根瘤菌磷化通道蛋白DRK1抗體Human PRIM1 ELISA Kit血小板相關(guān)免疫球蛋白(PAIg)ELISA Kit
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌電壓門(mén)控性通道Kv2.2抗體Human PRC1 ELISA Kit血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)ELISA Kit
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)新芒果苷
刺孢吸鏈霉菌北京變種Streptomyces│hygrospinosus var. beigingenis 質(zhì)量規(guī)格:99.8原子%D芒果苷
鐮孢屬Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)果糖
Nampt抑制劑(GNE-617)CD335/NKp46/NCR1 性受體NK-p46抗體3,5,5-己 ≥95%, Kosher
CD336/NKp44/NCR2 性受體NK-p44抗體三(2-呋喃)膦 99%
CD337/NKp30/NCR3 性受體NK-p30抗體雙硫 分析標(biāo)準(zhǔn)品
CD328/Siglec-7 唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集7抗體四化銨,一水 99%
CD329/SIGLEC9 唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集9抗體四硫氫銨 色譜級(jí)
KLRF1/NKp80 性受體NK-p80抗體四硫氫銨 99%
SIGLEC10/SLG2 唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集抗體(S)-(+)-1,2,3,4-四氫-1-萘 >99%, ee >98%
Cdc6 分裂周期蛋白6抗體頻那 97%