商品介紹:
AAI101是一種廣譜的β-lactamase抑制劑,能夠抵抗很多耐藥革蘭氏陰性細(xì)菌。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1001404-83-6 純度:98.0% 分子量:314.32 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
酯封端外消旋聚乳(重均分子量0.5-1.5萬)英文名稱: Tropine陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)器1抗體包裝25g
酯封端外消旋聚乳(重均分子量1.5-3萬)英文名稱: CoenzymeQ9氧化低密度脂蛋白抗體包裝5g
酯封端外消旋聚乳(重均分子量109-150萬)英文名稱: CoenzymeQ9骨鈣蛋白/骨鈣抗體包裝1g
酯封端外消旋聚乳(重均分子量150-190萬)英文名稱: Leucoson視變誘導(dǎo)蛋白抗體包裝5g
酯封端外消旋聚乳(重均分子量16-28萬)英文名稱: Lamivudine胚胎干關(guān)鍵蛋白2抗體包裝1g
酯封端外消旋聚乳(重均分子量190-240萬)英文名稱: Bambuterol Hydrochloride胚胎干關(guān)鍵蛋白1抗體包裝25g
酯封端外消旋聚乳(重均分子量28-42萬)英文名稱: N-Acetyl-D-Glucosamine衰老相關(guān)Sigma受體蛋白抗體包裝5g
酯封端外消旋聚乳(重均分子量3-6萬)英文名稱: Tropicamide有機(jī)溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白OSTβ抗體包裝1g
酯封端外消旋聚乳(重均分子量42-57萬)英文名稱: Oxiracetam嗅球蛋白1抗體包裝5g
酯封端外消旋聚乳(重均分子量57-73萬)英文名稱: Bevantolol hydrochloride眼部白化病相關(guān)蛋白OA1/蛋白偶聯(lián)受體143抗體包裝1g
酯封端外消旋聚乳(重均分子量6-9.5萬)英文名稱: Bupivacaine Hydrochloride Monohydrate癌基因蛋白抑瘤M抗體包裝5g
酯封端外消旋聚乳(重均分子量73-109萬)英文名稱: Bicyclol卵巢癌相關(guān)基因2蛋白抗體包裝250mg
酯封端外消旋聚乳(重均分子量9.5-16萬)英文名稱: Benidipine Hydrochloride跨膜蛋白Orai2抗體包裝1g
酯封端右旋聚乳(重均分子量0.3-1.5萬)英文名稱: Meisoindigo耳聾、常染色體隱性遺傳22抗體包裝25g
酯封端右旋聚乳(重均分子量1.5-3萬)英文名稱: Buspirone Hydrochloride1號(hào)染色體開放閱讀框80抗體包裝5g
腸膜明串珠菌Leuconostoc│mesenteroides 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR基質(zhì)金屬蛋白12試劑盒貝萼皂苷元;Bayogenin
肉桂地鏈霉菌Streptomyces│cinnamonensis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品基質(zhì)金屬蛋白10試劑盒白花前胡丁 ;Praeruptorin
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)基質(zhì)金屬蛋白1試劑盒扁柏雙黃 ;hinokiflavone
β-lactamase抑制劑(AAI101)珠蛋白抗體香茅 CITRONELLAL, (-)-(SG)Human, Mouse, Rat
尿卟啉原脫羧抗體香茅 CITRONELLOL, D/L-B-(SG)Human, Mouse, Rat
磷化信號(hào)淋巴活化分子CD150抗體香茅 CITRONELLOL, D/L-B-(SG)Human, Mouse, Rat
泛激活2B抗體檸檬 CITRAL(CIS- AND TRANS- MIX)(AS)Human, Mouse
ATP-依賴的RNA解旋p47抗體檸檬 CITRAL(CIS- AND TRANS- MIX)(AS)Human, Mouse
等上游激因子1抗體CITROPTEN(P)Human, Mouse, Rat
泛化組蛋白H2AX抗體CITROPTEN(P)Human
TH糖蛋白抗體CITROPTEN(P)Human
紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白1抗體CIWUJIANOSIDE B (RG)Human, Mouse, Rat