公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:MET激酶抑制劑(AMG-337)
英文名稱:AMG-337
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
AMG-337是一種有效的高度選擇性的ATP競爭性MET激酶抑制劑,IC50<5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1173699-31-4 純度:99.19% 分子量:463.46 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
細(xì)枝孢轉(zhuǎn)(轉(zhuǎn)羥乙)抗體(C端)Anti-KCNJ1 Antibody輸入蛋白5(IPO5)
嗜麥芽黃單胞菌色羥化抗體Anti-KCNJ16 Antibody輸入蛋白4(IPO4)
樟疫霉腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體抗體Anti-KCNMA1 Antibody輸入蛋白13(IPO13)
簡青霉轉(zhuǎn)甲狀腺蛋白/前白蛋白抗體Anti-KDM2A Antibody輸入蛋白11(IPO11)
Enterobacter sp.端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體Anti-KCNN4 Antibody輸卵管糖蛋白1(OVGP1)
鼠李糖乳桿菌酪激A抗體Anti-KCNQ1 Antibody輸出蛋白7(XPO7)
平流層芽孢桿菌腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體Anti-KDM5B Antibody輸出蛋白6(XPO6)
黃曲霉腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體Anti-KDR Antibody輸出蛋白5(XPO5)
植物乳桿菌植物亞種微管相關(guān)蛋白抗體Anti-KDM6B Antibody輸出蛋白4(XPO4)
玉米黑粉菌Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗體Anti-KDR Antibody輸出蛋白3(XPO3)
香菇粘合(固生蛋白)抗體Anti-KDR Antibody輸出蛋白1(XPO1)
葡萄座腔菌三葉肽因子3抗體Anti-KDR Antibody受體相互作用絲蘇激2(RIPK2)
亞褐鈸孔菌組織因子途徑抑制劑-2抗體Anti-KIF15 Antibody受體活性修飾蛋白2(RAMP2)
*百脈根根瘤菌轉(zhuǎn)移生長因子α抗體(TGFα)Anti-KEAP1 Antibody嗜中性粒胞漿因子4(NCF4)
多主葡萄殼菌轉(zhuǎn)化生長因子β1抗體(TGFβ1)Anti-KERA Antibody嗜中性粒胞漿因子2(NCF2)
泡盛曲霉轉(zhuǎn)移生長因子β2抗體(TGFβ2)Anti-KIBRA/WWC1 Antibody嗜性粒過氧化物(EPX)
角質(zhì)蛋白β抗體蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)(斜面)大鼠肺泡上皮細(xì)胞
細(xì)胞粘附分子伴侶蛋白1抗體沼澤紅假單胞菌(菌液)(暫無)大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞
細(xì)胞粘附分子伴侶蛋白2抗體腸致病性大腸埃希氏菌大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白9抗體色葡萄球菌亞種大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞
MET激酶抑制劑(AMG-337)屎腸球 頭拉定酚氧化Elisa
小孢根霉原變種 β-香茅過氧化氫Elisa
思爾娃假絲酵母 超氧化物歧化Elisa
斐萊氏溫?fù)P球蟲 醋酸己定酚氧化Elisa
小青霉 十二烷基苯磺酸雌二Elisa
香菇 香葉孕酮Elisa
美澳型核果褐腐病 4-苯髓過氧化物Elisa
煙曲霉 表沒食子兒茶谷氨酰Elisa
溜曲霉 麥角甾堿性磷酸Elisa
沃氏富鹽 聚乙烯亞碳酸酐Elisa
尖孢鐮孢 銀杏葉巰基轉(zhuǎn)移Elisa
動物雙歧桿乳亞種 阿他汀超氧化物歧化Elisa
粘滑菇屬 羅伐他汀7-乙氧基-3-異吩惡唑酮-脫乙基Elisa
地衣芽孢桿 甲基磺酸鈉金屬硫蛋白Elisa
托姆青霉 環(huán)戊酸雌二多酚氧化Elisa