以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Rac GTPase抑制劑 | NSC 23766 trihydrochloride | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
英文名稱:NSC 23766 trihydrochloride 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg NSC23766trihydrochloride是特異性的Rac GTPase抑制劑,用于癌癥研究。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1177865-17-6 純度:99.78% 分子量:530.96 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
桑炭疽盤菌谷脫羧-65抗體Human TBCD ELISA Kit大鼠甲狀腺過氧化物(TPO)IgG抗體免疫試劑盒
乳乳球菌乳亞種谷脫羧-65抗體(C端)Human TAF7 ELISA Kit大鼠甲狀腺過氧化物(TPO)免疫試劑盒
粉擬青霉半乳糖凝集3抗體Human MTTP(Microsomal triglyceride transfer protein large subunit) ELISA Kit大鼠甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)免疫試劑盒
黑色附球孢菌神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43Human TASP1 ELISA Kit大鼠甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒
鼠李糖乳桿菌3-磷甘油脫氫(兔來源免疫組化用抗體)Human TARSL2 ELISA Kit大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫試劑盒
布蘭克假絲酵母3-磷甘油脫氫單克抗體(內(nèi)參抗體)Human TARS2 ELISA Kit大鼠甲羥戊5-焦磷脫羧(MDD)免疫試劑盒
細(xì)黃鏈霉菌乳糖變種生長停滯特異性蛋白2家族1抗體Human TAX1BP1 ELISA Kit大鼠低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌G蛋白偶聯(lián)受體97抗體Human TAX1BP3 ELISA Kit大鼠激肽原(KNG)免疫試劑盒
羊泰勒蟲(臨潭株-1)G蛋白結(jié)合蛋白7抗體Human TBC1D17 ELISA Kit大鼠激動(dòng)異構(gòu)/分裂MB(CKMB)免疫試劑盒
巴斯德畢赤酵母綠色熒光蛋白抗體Human TBC1D19 ELISA Kit大鼠基質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)免疫試劑盒
蠟樣芽孢桿菌綠色熒光蛋白抗體Human PANX1(Pannexin-1) ELISA Kit大鼠基質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫試劑盒
葡萄座腔菌G蛋白通路抑制蛋白1抗體Human TACC2 ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)免疫試劑盒
Myxococcus sp.膠質(zhì)系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α2抗體Human C4B(Complement C4-B) ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)免疫試劑盒
米舒青霉核突觸蛋白-γ抗體Human TACC3 ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒
三孢布拉霉粒-巨噬克激因子抗體Human TADA1L ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B) 免疫試劑盒
亞硝鹽對(duì)照液還原抗體Human TACO1/CCDC44 ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8/Collagenase II)免疫試劑盒
寡養(yǎng)野野村氏菌Nonomuraea│astidiosa corrig. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品穗花杉雙黃
: K77/39資源名稱: 吉夫沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品, 用于環(huán)境分析沙苑子苷A
擬莖點(diǎn)霉Phomopsis│liquidambari C.Q. Chang Z.D. Jiang & P.K. Chi 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.9%(GC)巴豆苷
Rac GTPase抑制劑弗氏檸檬酸桿 4-氨基睪酮Elisa
雜色曲霉 4-氨基丁酸甲酯 鹽酸鹽促黃體Elisa
長雙歧桿長亞種 1-芐氧羰基-3-吡咯烷酮催乳Elisa
平臍蠕孢 砷化銦布氏桿抗體Elisa
杏鮑菇 N-Fmoc-D-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸Bcl-2相關(guān)X蛋白Elisa
豇豆慢生根瘤 N-芴甲氧羰基-L-天冬氨酸4-環(huán)己基酯B瘤因子2Elisa
巴氏微桿 2,2′-雙溴雙苯γ干擾Elisa
德沃斯氏 硒化鋁白介12Elisa
假單胞屬 活性氧化鋁白介2Elisa
擬粉紅鎖擲孢酵母 活性氧化鋁蛋白酪氨酸激Elisa
硫磺 活性氧化鋁核因子κBElisa
植物乳桿植物亞種 N-Boc-3-甲酸乙酯環(huán)氧合2Elisa
科大百平(平菇類) 1,4-萘醌基質(zhì)金屬蛋白2Elisa
淡黑假黑盤 1-萘磺酸鈉基質(zhì)金屬蛋白9Elisa
柴油食烷 洛莫司汀可溶性MHC-I鏈相關(guān)基因AElisa