LIMK1抑制劑(BMS-3)公司*的產(chǎn)品：Anti-phosphoM-CSF Receptor(Tyr923)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-NEDD4L/NEDD4-2/FITC 熒光素標(biāo)記泛素連接酶NEDD4-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：LIMK1抑制劑(BMS-3)

英文名稱：BMS-3

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

棒形青霉CD59抗體Human PRSS23(Protease, Serine 23) ELISA Kit人糖類抗原125(CA125)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(N端)Human RB1(Retinoblastoma Protein 1) ELISA Kit人糖基化依賴的黏附分子(GlyCAM-1)免疫試劑盒

地衣芽胞桿菌鈣激活蛋白14抗體Human PRSS33(Protease, Serine 33) ELISA Kit人糖化血紅蛋白A1c(A1c)免疫試劑盒

三線鐮孢角蛋白18抗體（C端）Human PTGIS(Prostaglandin I Synthase) ELISA Kit人糖化低密度脂蛋白(Gly-LDL)免疫試劑盒

爪哇根霉7型膠原抗體Human REPIN1(Replication Initiator 1) ELISA Kit人糖化白蛋白(GA)免疫試劑盒

巨大芽孢桿菌 A磷化β 連環(huán)蛋白抗體Human PTP1B(protein tyrosine phosphatase 1B) ELISA Kit人糖蛋白130(gp130)免疫試劑盒

香菇原癌蛋白CBL2抗體Human RIPK2(Receptor TNFRSF Interacting Serine Threonine Kinase 2) ELISA Kit人羰基還原[NADPH] 1(CBR1/CBR/CRN)免疫試劑盒

美人魚發(fā)光桿菌美人魚亞種信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α抗體Human RLN2(Relaxin-2) ELISA Kit人碳酐9(CA9)免疫試劑盒

仁果叢梗孢信號(hào)淋巴活化分子CD150抗體Human PTPRJ(Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type J) ELISA Kit人碳酐6(CA-6)免疫試劑盒

醋化醋桿菌巨噬炎性蛋白16抗體Human PTPN14(protein tyrosine phosphatase, non-receptor type 14) ELISA Kit人碳酐3(CA3)免疫試劑盒

尖孢果蠅CG6856-PA抗體Human PYGL(Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA Kit人碳酐2(CA-2)免疫試劑盒

格爾木馬賽菌色c氧化COX7A2抗體Human PYGM(Glycogen Phosphorylase, Muscle) ELISA Kit人碳酐12(CA-12)免疫試劑盒

嗜熱鏈球菌剪切和多聚腺苷化特異性因子4抗體Human PTPRN(Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type N) ELISA Kit人碳酐(CA)免疫試劑盒

假單胞菌組織蛋白E抗體Human pNF-H(Phosphorylated Neurofilament H) ELISA Kit人肽酰脯酰異構(gòu)(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)免疫試劑盒

綠粘帚霉緊密連接蛋白5抗體Human pro-IL1β(pro interleukin 1 beta) ELISA Kit人肽聚糖識(shí)別蛋白L(PGRP-L)免疫試劑盒

平滑白蛋巢菌分化周期CDC42相互作用蛋白4抗體Human Pro-MMP-1(pro-Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit人肽聚糖(PG)免疫試劑盒

巨獸芽孢桿菌Bacillus│megaterium 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCD82分子試劑盒二氫草莓

無花果曲霉Aspergillus│ficuum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCD73分子試劑盒二氫石蒜堿

假單胞菌Pseudomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCD6分子試劑盒二氫
LIMK1抑制劑(BMS-3)纖維蛋白溶原抗體包裝250mg

DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體包裝5g

蛋白質(zhì)精基轉(zhuǎn)移1抗體包裝25g

色P450 1A2抗體包裝5g

磷化磷酯Cγ1抗體包裝1g

磷化磷酯Cγ1抗體包裝25g

磷化磷酯Cγ1抗體包裝5g

磷化絲/蘇蛋白激Plk1抗體包裝5mg

磷化多聚合苷激3磷化抗體包裝100ml

突觸后密度蛋白93抗體包裝500ml

磷化突觸后密度蛋白93抗體包裝100mg

磷化突觸后密度蛋白95抗體包裝1g

磷化腫瘤抑制基因PTEN抗體包裝25g

磷化腫瘤抑制基因PTEN抗體包裝5g

樁蛋白Paxillin抗體包裝5g 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)