商品介紹:
Bay60-7550是一種選擇性的PDE2抑制劑,Ki為3.8±0.2nM,也是一種NO調(diào)節(jié)劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):439083-90-6 別名:BAY 607550 純度:98.12% 分子式:C??H??N?O? 分子量:476.57 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
釀酒酵母神經(jīng)元膜糖蛋白錨定蛋白2抗體Human NCOA1(Nuclear receptor coactivator 1) ELISA Kit可溶性髓系觸發(fā)受體-1(sTREM-1)ELISA Kit
黃硬皮馬勃MYRIP蛋白抗體Human SLC30A8(Zinc transporter 8) ELISA Kit可溶性瘦受體(sLR)ELISA Kit
球孢白僵菌髓磷酯髓鞘蛋白1抗體Human GRIN1(Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 1) ELISA Kit可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)ELISA Kit
大豆慢生根瘤菌巨噬克激因子抗體Human SLC25A12(Calcium-binding mitochondrial carrier protein Aralar1) ELISA Kit可溶性磷脂A2(sPL-A2)ELISA Kit
單胞菌膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體Human UBAP2(Ubiquitin-associated protein 2) ELISA Kit可溶性間皮相關(guān)肽(SMRP)ELISA Kit
鏈格孢肌球蛋白輕鏈激抗體Human FSCN2(Fascin-2) ELISA Kit可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA Kit
木糖駒形氏桿菌單紡錘體蛋白激1抗體Human REG3γ(RegeneRating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA Kit
芽孢桿菌屬有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體Human CDC42(Cell division control protein 42 homolog) ELISA Kit可溶性核因子κB受體活化因子(sRANK)ELISA Kit
細(xì)鏈格孢單氧化B抗體Human S1PR2(Sphingosine 1-phosphate receptor 2) ELISA Kit可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)ELISA Kit
野油菜黃單胞菌微小染色體維持缺陷蛋白4抗體Human S1PR3(Sphingosine 1-phosphate receptor 3) ELISA Kit可溶性淀粉前體蛋白α(sAPPα)ELISA Kit
擬青霉自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體Human S1PR4(Sphingosine 1-phosphate receptor 4) ELISA Kit可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA Kit
產(chǎn)色鏈霉菌髓鞘基因調(diào)控因子抗體Human LPL(Lipoprotein lipase) ELISA Kit可溶性彈性蛋白片段(sELAF)ELISA Kit
淡紫擬青霉肌球蛋白結(jié)合蛋白C抗體Human TAC1(Protachykinin-1) ELISA Kit可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集3(Lgals3)ELISA Kit
變天藍(lán)鏈霉菌磷化絲裂原活化蛋白激磷1抗體Human PFN2(Profilin-2) ELISA Kit可溶性白抗原G(sHLA-G)ELISA Kit
肉桂鏈霉菌促代謝型谷受體2抗體Human MCAb(Melanocyte antibody) ELISA Kit可溶性白介7受體(sIL-7R)ELISA Kit
羊巴貝斯蟲(天祝株)代謝型谷受體-3抗體Human NDN(Necdin) ELISA Kit可溶性P選擇(sP-selectin)ELISA Kit
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:700u/mg,羅氏分裝鹽育亨賓
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:98%,標(biāo)準(zhǔn)品木糖
毛霉Mucor│sp. 質(zhì)量規(guī)格:98%,BR七葉皂苷鈉
PDE2抑制劑(Bay 60-7550)APOA1 載脂蛋白A1抗體曙紅Y,溶 AR
FASN 脂肪合成抗體曙紅Y(水溶) ACS
Apo B 載脂蛋白B抗體熒光 AR,90%
FAST kinase Fas活化的絲/蘇氨激抗體熒光 IND
FasL 兔抗FasL抗體。熒光鈉 AR
fatty acid elongase 脂肪延長(zhǎng)抗體吉氏色 BS
Fc gamma RII a/CD32a 免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體鉻鉛 AR,98.0%
FBN1 原纖維蛋白1抗體藍(lán) AR