商品介紹:
用途: 肌纖維、纖維素的染色,尤其適用于橫紋肌/平滑肌染色 注意事項(xiàng): 染色液采用自然氧化法使其成熟。橫紋肌的橫紋、纖維素、胞核、紅細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)纖維呈深藍(lán)色,膠原纖維、軟骨呈棕紅色。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,24個(gè)月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Mallory PTAH染色液(自然氧化法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
Hederacolchiside A1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Victoria blue B免疫球蛋白超家族成員12抗體包裝5g
Hederacolchiside E英文名稱: Brilliant Blue R草酰琥珀脫羧α抗體包裝25g
Hederagenin 3-O-α-L-rhamnop...英文名稱: Brilliant Blue G干擾alpha 5蛋白抗體包裝5g
Hyponine D英文名稱: Bromophenol blue胰島樣生長(zhǎng)因子1抗體包裝25g
Hyponine E英文名稱: Fast Blue B SaltKB抑制蛋白激β抗體包裝5g
Indaconitine(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Alcian blue 8GX囊包蛋白/內(nèi)披蛋白抗體包裝1g
Karacoline英文名稱: Blue tetrazolium胰島受體相關(guān)受體抗體包裝25g
L-薄荷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: MTTINCA1蛋白抗體包裝5g
L-(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ALLURA RED ACIQCE蛋白抗體包裝1g
L-鼠李糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Erioglaucine disodium salt雞傳染性法氏囊病病抗體包裝5g
L-細(xì)辛脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Solifenacin succinate整合β6/Integrin β6抗體包裝1g
levatin英文名稱: Crystal violet磷肌磷蛋白INPP5抗體包裝25g
Lup-20(29)-en-28-oic acid, ...英文名稱: Crystal violet白介4誘導(dǎo)蛋白1抗體包裝5g
Monnieriside G英文名稱: Iodonitrotetrazolium chloride(INT)分化相關(guān)基因2蛋白/立即早期反應(yīng)蛋白抗體包裝1g
Multicaulisin英文名稱: Ethyl Violet間粘附分子4抗體包裝5g
淡紫擬青霉Paecilomyces│lilacinus (Thom) Samson 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR粒特異性抗核抗體試劑盒金剛烷;Adamantane
南極棲海面菌Aequorivita│antarctica 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品粒趨化蛋白-2試劑盒京尼平苷;Geniposidic ac
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR粒巨噬集落激因子抗體試劑盒金石蠶苷;Poliumoside
Mallory PTAH染色液(自然氧化法)土壤成對(duì)桿 2-氯酰氯黃色Elisa
球毛殼 4-氯-2-甲氧基苯酸α-烯化Elisa
炭疽臟器抗原(液體) N-乙?;?2-O-(4-甲基-2-氧代-2H-1-苯并吡喃-7-基)-ALPHA-神經(jīng)氨酸一鈉鹽烯Elisa
假單胞屬 4,5-二氟-1,2-苯二當(dāng)量抗氧化能力Elisa
褐頂環(huán)柄菇 2,5-雙(三氟甲基)溴苯抗亞油酸氧化能力Elisa
大豆 大豆轉(zhuǎn)基因成分(陽(yáng)性) 1-甲基吡唑-4-酸頻哪酯DPPH自由基清除能力Elisa
釀酒酵母 (R)-(+)-2-溴-alpha-甲鐵氧還原能力Elisa
土壤三線鐮孢 甲基烯酸酐8-羥脫氧鳥苷Elisa
黑曲霉 1-Boc-3-氧哌β-羥丁酸脫氫Elisa
大肥蘑菇 2-溴-4-芪合Elisa
Arthrobacter 6-硝基吲唑腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化Elisa
大腸埃希 (S)-(+)-2,2-二甲基環(huán)烷甲酰不溶性酸性轉(zhuǎn)化Elisa
糙孢藍(lán)狀 2,5-二氟芐可溶性酸性轉(zhuǎn)化Elisa
粘狀曲霉 2,3-二氟苯甲8-氧鳥嘌呤Elisa
米曲霉 乙酸鋯葉黃-3-乙酸Elisa