公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:ROCK1和ROCK2抑制劑(GSK429286A)
英文名稱:GSK429286A
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
GSK429286A是選擇性的ROCK1和ROCK2抑制劑,IC50值為14nM和63nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:864082-47-3 純度:99.13% 分子量:432.37 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
松口蘑絲/蘇激蛋白Pim1抗體Anti-CDH3 Antibody胰島樣生長因子Ⅰ受體(IGF-ⅠR)
蠟狀芽孢桿菌磷化前病整合位點蛋白1抗體Anti-CDH4 Antibody胰島樣生長因子1受體(IGF-R1)
果生核盤菌肽基脯酞順反異構(gòu)Pinl抗體Anti-CDH3 Antibody胰島樣生長因子1受體(IGF-1R)
產(chǎn)氣莢膜梭菌 E型磷化肽基脯酞順反異構(gòu)Pinl抗體Anti-CDH5 Antibody血小板內(nèi)皮粘附分子-1(PECAM-1/CD31)
巴西固氮螺菌磷化孕激受體抗體Anti-CDK1 Antibody血小板內(nèi)皮粘附分子1(PECAM1)
解鳥克雷伯氏菌磷化磷脂酰肌激(PI3Kβ)抗體Anti-CDK1 Antibody(PB0561)血小板/內(nèi)皮粘附分子-1(PECAM-1/CD31)
黑腐皮殼菌磷化蛋白磷2A(PP2Aα)抗體Anti-CDK2 Antibody(PB0562)血小板/內(nèi)皮粘附分子1(PECAM1)
葡萄酒色被孢霉絲/蘇蛋白激5抗體Anti-CDK2 Antibody血漿炎性趨化因子(CXCL9/MIG)
大腸埃希菌蛋白激Cα相互作用蛋白1抗體Anti-CDK5 Antibody胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TAFA/CCL17)
鏈格孢菌磷相互作用結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Anti-CDK16 Antibody外基質(zhì)金屬蛋白誘導(dǎo)因子(EMMPRIN/CD147)
硫磺菌蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基1A抗體Anti-CDK4 Antibody凋亡因子配體(Fas-Ligand)
地霉蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基1B抗體Anti-CDK4 Antibody(PB0563)糖蛋白130(gp130/CD130)
酒紅鏈霉菌蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基3A抗體Anti-CDK5 Antibody胎球蛋白A(Fetuin-A)
膠孢蛋白質(zhì)磷1B抗體(PP2Cβ)Anti-CDK5R1 Antibody胎球蛋白A(FetuinA)
球孢白僵菌蛋白質(zhì)磷1G抗體(PP2Cγ)Anti-CDK6 Antibody性成纖維生長因子(FGF1)
亮白曲霉6磷果糖激1抗體Anti-CDK6 Antibody性成纖維生長因子(AFGF/FGF1)
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:0.98
ROCK1和ROCK2抑制劑(GSK429286A)pCDNA3.1(+) 2-基吡表皮生長因子Elisa
阿達青霉 4,6-二羥基-2-甲硫基嘧啶細小病Elisa
釀酒酵母 2-溴-6-色C氧化Elisa
干酪乳桿 2-氟-3-孕酮受體Elisa
香魏菇 2-巰基乙烷磺酸鈉雌二受體Elisa
褐帶栓 3,3'-亞甲基二睪酮Elisa
銅綠假單胞 L-烯基甘氨酸維生AElisa
枯草芽孢桿 4-溴吡啶鹽酸鹽Elisa
Rhizobium miluonense 4-甲氧基苯肼鹽酸鹽疫巴氏桿抗體Elisa
金黃色葡萄球 2-脫氧-D-半乳糖鴨疫巴氏桿抗體Elisa
鼠傷寒沙門氏 TA102 4-氟-2-三氟甲甘油-3-磷酸脫氫Elisa
金龜子綠僵 2-異酸乙酯甘油-3-磷酸脫氫Elisa
寬褶菇 2(2-吡啶)酮疫里默氏桿1型Elisa
棲土藤黃色單胞 9-溴芴疫里默氏桿Elisa
橙灰鏈霉 乙酰酮鈣(CAA)8羥基脫氧鳥苷Elisa