商品介紹:
Vatalanib是VEGFR2/KDR的抑制劑,其IC50值為37nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):212141-51-0 別名:PTK787 dihydrochloride;PTK/ZK dihydrochloride;CGP-79787D dihydrochloride;CGP-79787 dihydrochloride;ZK-222584 dihydrochloride 純度:99.86% 分子量:419.73 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
VEGFR2/KDR抑制劑(Vatalanib) | Vatalanib dihydrochloride | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
褐孢大禿馬勃基質(zhì)衍生因子4抗體(鈣結(jié)合蛋白)Anti-PLAUR Antibody人抗凝血(AT)
多根硬皮馬勃肝癌蛋白剪接變異體蛋白抗體Anti-PLAUR Antibody人抗內(nèi)因子抗體(AIFA)
大腸埃希氏桿菌結(jié)腸癌抗原8抗體Anti-PLAUR Antibody人抗繆勒管激(AMH)
側(cè)耳T淋巴識(shí)別的鱗狀癌SART3抗體Anti-PLCB1 Antibody人抗抑制因子1(AZIN1)
孔球孢霉磷化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體Anti-PLAUR Antibody人抗麥膠蛋白(AGA)
熱帶根瘤菌血清學(xué)定義結(jié)腸癌抗原1抗體Anti-PLCG2 Antibody人抗利尿激(ADH)
重金屬鉛速測(cè)試劑包信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體Anti-PLD1 Antibody人抗性磷(ACP5)
粗皮馬勃磷化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體Anti-PLEXINA2 Antibody人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA)
谷棒桿菌結(jié)腸癌抗原10抗體Anti-PLD2 Antibody人抗甲基乙二抗體(AMA)
四川散斑殼核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體Anti-PLG Antibody人抗肌蛋白(UTRN)
遼寧盤(pán)孢膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FP1抗體Anti-PLEC Antibody(PB0420)人抗核糖體抗體(Anti-rRNP)
大腸埃希氏菌階段特異性胚胎表面抗原-3抗體Anti-PLG Antibody人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA)
昆明假諾卡氏菌原癌基因18家族STMN3蛋白抗體Anti-PLG Antibody人抗核糖核蛋白抗體(Anti-RNP)
球孢鏈霉菌球孢亞種階段特異性胚胎表面抗原4抗體Anti-PLIN1 Antibody人抗核膜糖蛋白210抗體(AGPA)
寒冷桿菌骨架相關(guān)蛋白抗體Anti-PLIN1 Antibody人抗谷脫羧抗體(Anti-GAD)
馬賽博斯氏菌磷化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體Anti-PLIN1 Antibody人抗肝腎微粒體抗體(Anti-LKMA)
核仁蛋白8抗體德氏乳桿菌乳亞種人牙周膜成纖維細(xì)胞提取物
核孔復(fù)合體蛋白88抗體食丁芽孢桿菌人食管癌組織源成纖維細(xì)胞提取物
豆蔻?;D(zhuǎn)移1抗體灰色鏈霉菌銹色變種人胃癌組織源成纖維細(xì)胞提取物
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3抗體鮭色鎖擲酵母人胰腺癌組織源細(xì)胞提取物
VEGFR2/KDR抑制劑(Vatalanib)釀酒酵母 Carbamic acid甲基睪酮Elisa
釀酒酵母 Epinodosin腺苷酸活化蛋白激Elisa
谷氨酸棒桿Ⅰ型 Shikokianin腺苷酸活化蛋白激Elisa
Paenibacillus Glychionide A卵母成熟抑制因子Elisa
鳥(niǎo)氨酸微屬 Rubrisandrin AD-乳酸Elisa
米曲霉 Eucalyptolic acid一氧化氮合成Elisa
釀酒酵母 Jacoumaric acid單氧化Elisa
大腸埃希 Platyconic acid A纖溶原Elisa
產(chǎn)蛋下降綜合征病 Rabdosin B巨噬移動(dòng)抑制因子Elisa
球孢白僵 Kusunokinin低氧誘導(dǎo)因子1Elisa
米曲霉 Prionoid B腦紅蛋白Elisa
匍匐曲霉原變種 Lucidal抗酸性磷酸5bElisa
綠色木霉 Erythrinin A組織蛋白KElisa
球孢白僵 Brosimacutin G骨特異性堿性磷酸BElisa
大腸埃希氏 Bakuchalcone低氧誘導(dǎo)因子-1αElisa