商品介紹:
LJI308是新型有效的RSK抑制劑,抑制RSK1,RSK2,和RSK3IC50值分別為6nM,4nM,和13nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1627709-94-7 純度:99.40% 分子量:368.38 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:RSK抑制劑(LJI308)
英文名稱:LJI308
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
細(xì)鏈格孢人P糖蛋白/滲透性糖蛋白Anti-Phospho AQP2 (Ser261) Antibody人肌球蛋白輕鏈激(MLCK)
葡萄座腔菌小鼠凝血抗凝血復(fù)合物Anti-Phospho ANAPC1 phospho S355 (S355) Antibody人肌球蛋白輕鏈激(MLCK)
傳染性喉氣管炎病人大腸癌專一抗原3Anti-Phospho AR (AR) (Ser94) Antibody人硫轉(zhuǎn)移pi基因(GSTpi)
味側(cè)耳小鼠抗凝血受體Anti-Phospho ATF2 (Ser490,498) Antibody人硫轉(zhuǎn)移pi基因(GSTpi)
馬賽菌大鼠髓過氧化物Anti-Phospho ARHGAP35 (Tyr1105) Antibody人S轉(zhuǎn)移(GSTs)
漢遜德巴酵母漢遜變種大鼠顆粒BAnti-Phospho ARHGAP22 (S397) Antibody人S轉(zhuǎn)移(GSTs)
果生鏈核盤菌人大腸癌專一抗原2Anti-Phospho ATM (S1981) Antibody人泛分解(DUB)
球毛殼小鼠凝血受體Anti-Phospho ATF2 (Thr52) Antibody人泛分解(DUB)
小馬勃人大腸癌專一抗原4Anti-Phospho BECN1 (Ser234) Antibody人分泌型磷脂A2(sPLA2)
炭黑曲霉大鼠顆粒AAnti-Phospho BRAF (Thr599) Antibody人分泌型磷脂A2(sPLA2)
類干酪乳桿菌小鼠心肌肌鈣蛋白ⅠAnti-Phospho BECN1 (Ser295) Antibody人泛連接(E3/UBPL)
盤孢菌大鼠淋巴趨化因子Anti-Phospho ATRIP (Ser239) Antibody人泛連接(E3/UBPL)
屎腸球菌小鼠磷肌3激Anti-Phospho CAMK1 (Thr177) Antibody人肥大類(MCT)
奧氏蜜環(huán)菌人粘蛋白/粘液5BAnti-Phospho CCDC88A (Ser1417) Antibody人肥大類(MCT)
中慢生根瘤菌屬人腸三葉因子Anti-Phospho CCNC (Ser275) Antibody人多巴色異構(gòu)(DT)
小鼠β內(nèi)啡肽Anti-Phospho CD247 (Tyr142) Antibody人多巴色異構(gòu)(DT)
gp130結(jié)合蛋白GAM抗體宓花豆根瘤菌牛乳腺上皮細(xì)胞
B淋巴細(xì)胞基因1抗體毛霉DMEM/F12*培養(yǎng)基:
轉(zhuǎn)化生長因子β1誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子1抗體蟬擬青霉HT-1080*培養(yǎng)基:
跨膜蛋白16C抗體石榴小赤殼人骨巨細(xì)胞瘤細(xì)胞
RSK抑制劑(LJI308)無 3,4,5-氧基
銳齒櫟枝枯病 乙酰
槲櫟枝枯病 5,6-Dihydropyridin-2(1H)-one
黃曲霉 3',4'-Dihydroxyacetophenone
葡萄球?qū)?/span> 4-硝基乙酰苯
羅伊氏乳桿 3-(4-羥基苯基)-1-
大腸埃希氏 2,5-二羥基苯甲
灰樹花 2,4-二羥基苯乙酮
枯草芽孢桿 2-甲烯基丁內(nèi)酯
總狀毛霉 二氫辣椒酯
黑曲霉 3,3',4',5-四甲氧基二苯乙烯
糙孢藍(lán)狀 買麻藤
Rhizobium miluonense 松茋
胡椒枯萎病 白藜蘆三芐
易脆毛霉 3'-羥基紫檀茋