商品介紹:
Sibutramine hydrochloride是一種新型的5-HT(serotonin)和去甲再攝取抑制劑(SNRI)。Sibutramine抑制電壓門控K+通道KV4.3,IC50為17.3μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):84485-00-7 別名:BTS 54-524 純度:98.0% 分子式:C??H??Cl?N 分子量:316.31 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:SNRI抑制劑(Sibutramine hydrochloride)
英文名稱:Sibutramine hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
根瘤菌腦蛋白9抗體Human PAEP(Glycodelin) ELISA Kit一氧化氮(NO)ELISA Kit
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種絲裂原誘導(dǎo)蛋白2抗體Human PROX1 ELISA Kit葉受體α(FOLR1)ELISA Kit
解淀粉芽孢桿菌鋅指蛋白393抗體Human PRPF19 ELISA Kit葉受體(FOLR)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌組蛋白賴特異性脫甲基1抗體Human PROSC ELISA Kit葉(FA)ELISA Kit
扣囊復(fù)膜孢酵母驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體(甲狀腺激受體相互作用蛋白5)Human PRPF3 ELISA Kit氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISA Kit
宇佐美曲霉組蛋白甲基化KMT3B抗體(雄激受體激活蛋白)Human ZNF335(Zinc finger protein 335) ELISA Kit氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA Kit
黑曲霉離子通道蛋白Kv4.3抗體Human PRPF40A ELISA Kit氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)ELISA Kit
枯草芽胞桿菌Killin-p53調(diào)節(jié)復(fù)制抑制蛋白抗體Human PRKX ELISA Kit氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA Kit
盔狀畢赤酵母賴tRNA的連接抗體Human PRMT1 ELISA Kit氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA Kit
大腸埃希菌220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體Human PRPF40B ELISA Kit氧還原蛋白過(guò)氧化物4(PRDX4)ELISA Kit
嗜冷生孢八疊球菌磷化220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體Human PRPF6 ELISA Kit延伸蛋白A(EloA)ELISA Kit
發(fā)根土壤桿菌(發(fā)根植物單胞菌)(現(xiàn)1)基爾曼氏細(xì)小病VP1/VP2抗體(大鼠潛在病KRV)C端Human PRMT5(Protein arginine N-methyltransferase 5) ELISA Kit煙酰腺嘌呤二核苷磷(NADPH)ELISA Kit
灰毛青霉離子通道蛋白家族KCNQ1抗體Human PRMT8 ELISA Kit煙酰腺嘌呤二核苷(NAD)ELISA Kit
褐黃木耳(琥珀木耳)組蛋白H3 K9甲基轉(zhuǎn)移抗體Human PRMT3 ELISA Kit牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)ELISA Kit
Paenibacillus thailandensis生物鐘KAT13D蛋白抗體Human PRMT6 ELISA Kit牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)ELISA Kit
柄籃狀菌Kelch樣蛋白36抗體Human PRPF40A ELISA Kit循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA Kit
長(zhǎng)根小奧德蘑Xerula│radicata (Relhan) Dörfelt 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(R型)人參皂苷Rh1
人蒼白桿菌Ochrobactrum│anthropi 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)酪
多粘芽孢桿菌Bacillus│polymyxa 質(zhì)量規(guī)格:用于薄層色譜顯色劑DL-薄荷
SNRI抑制劑(Sibutramine hydrochloride)Phospho-cdc2 (Tyr15) 化周期依賴激2抗體硫代嗎啉 98%
Phospho-cdc2 (Thr161) 化周期依賴激2抗體綠草定 分析標(biāo)準(zhǔn)品
cdc25A 分裂周期蛋白25抗體2-酰檸檬三酯 99%
Phospho-cdc25A (Thr506) 化分裂周期蛋白25抗體三(硅)硅烷 90%
Phospho-cdc25A (Ser76) 化分裂周期蛋白25抗體溴化 99%
Phospho-cdc25A (Ser178) 化分裂周期蛋白25抗體 99.99%(劇品)
Phospho-cdc25C (Ser216) 化分裂周期蛋白25C抗體水質(zhì)標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品(劇品)
Phospho-cdc25C (Thr48) 化分裂周期蛋白25C抗體(+)-γ-維生E 96%