商品介紹:
MK-8931是BACE1的抑制劑,MK-8931能夠有效的結(jié)合β-secretase。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1286770-55-5 別名:MK-8931 純度:99.79% 分子式:C??H??F?N?O?S 分子量:409.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):BACE1抑制劑(Verubecestat)
英文名稱(chēng):Verubecestat
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
白布勒擔(dān)孢酵母有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣2抗體Human SOX18(Transcription factor SOX-18) ELISA Kit可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISA Kit
芽胞桿菌屬微原纖維膠原相關(guān)蛋白1抗體Human HEPH(Hephaestin) ELISA Kit可溶性腫瘤壞死因子樣凋亡弱誘導(dǎo)因(sTweak)ELISA Kit
嗜乳桿菌減數(shù)分裂核分裂蛋白1抗體Human SPON2(Spondin-2) ELISA Kit可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA Kit
彩色豆馬勃肌原調(diào)節(jié)抑制蛋白抗體Human C1QC(Complement C1q subcomponent subunit C) ELISA Kit可溶性腫瘤壞死因子受體2(sTNF-R2)ELISA Kit
游動(dòng)球菌雙微體2癌基因結(jié)合蛋白抗體Human SIRT4(NAD-dependent ADP-ribosyltransferase sirtuin-4) ELISA Kit可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA Kit
小粒凱斯特亞菌基質(zhì)金屬蛋白20Human GDF11(Growth/differentiation factor 11) ELISA Kit可溶性粘附分子(Sam)ELISA Kit
Patulibacter americanus多藥耐藥相關(guān)蛋白8抗體Human FABP5(Fatty acid-binding protein, epidermal) ELISA Kit可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA Kit
大肥菇多藥耐藥相關(guān)蛋白7抗體Human PFN2(Profilin-2) ELISA Kit可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)ELISA Kit
卷枝毛霉卷枝變型磷化卡波西氏肉瘤皰疹病潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體Human NCOR1(Nuclear receptor corepressor 1) ELISA Kit可溶性血管內(nèi)皮粘附分子1(sVCAM-1)ELISA Kit
解淀粉芽孢桿菌酪蛋白激分裂抗體Human NDN(Necdin) ELISA Kit可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)ELISA Kit
大豆慢生根瘤菌卡波西氏肉瘤皰疹病潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體Human IL31RA(Interleukin-31 receptor subunit alpha) ELISA Kit可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA Kit
黏連環(huán)紋炭團(tuán)菌黑色瘤抗原F蛋白家族1抗體Human S1PR5(Sphingosine 1-phosphate receptor 5) ELISA Kit可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(sVEGF R1)ELISA Kit
香菇糖蛋白GNTVA抗體Human HNRNPK(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K) ELISA Kit可溶性胸苷激1(TK1)ELISA Kit
球形賴(lài)芽孢桿菌IGFBP2結(jié)合蛋白/遷移和侵潤(rùn)抑制蛋白抗體Human ANXA3(Annexin A3) ELISA Kit可溶性腺苷環(huán)化(sAC)ELISA Kit
豬丹絲菌微管相關(guān)蛋白1B抗體Human ANXA1(Annexin A1) ELISA Kit可溶性因子受體(sCKR)ELISA Kit
多主枝孢錯(cuò)配修復(fù)蛋白3抗體Human NCOR2(Nuclear receptor corepressor 2) ELISA Kit可溶性間粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit
肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格:活1:2500,BR薯蕷皂苷元
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:活1:4500,BR秋仙堿
: AS2.247資源名稱(chēng): 粟酒裂殖酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR金雀花堿
BACE1抑制劑(Verubecestat)FAK2/Pyk2 富含脯氨的酪氨激2抗體 AR,98%
phospho-Pyk2 (Tyr402) 化富含脯氨的酪氨激2抗體鄰酚酞絡(luò)合劑 indicator
phospho-Pyk2 (Tyr881) 化富含脯氨的酪氨激2抗體鄰酚酞絡(luò)合劑 98%
FANCD2 FANCD2抗體結(jié)晶紫 AR
phospho-FANCD2(Ser222) 化FANCD2抗體 AR,97.0% (劇品)
FANCF 范可尼貧血相關(guān)蛋白F抗體 CP(劇品)
FAM3B/PANDER 胰腺衍生因子抗體丁二酮肟 AR,98%
FAS/Apo-1/CD95 載脂蛋白A1抗體鉻黑T Indicator