以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
JAK抑制劑(Oclacitinib) | Oclacitinib | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Oclacitinib是一種新型JAK抑制劑。Oclacitinib抑制JAK1有效,IC50為10nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1208319-26-9 別名:PF-03394197 分子量:337.44 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
地衣芽孢桿菌20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框141抗體Human ANGPTL2(Angiopoietin-related protein 2) ELISA Kit人胱抑F(CST7)免疫試劑盒
馬闊里類芽孢桿菌20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框160抗體Human OGDH(2-oxoglutaRate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit人胱抑B(CSTB/CST6/STFB)免疫試劑盒
扣囊復(fù)膜孢酵母親環(huán)蛋白(親環(huán))40抗體Human CCR4(C-C chemokine receptor type 4) ELISA Kit人胱抑A(CSTA/STF1/STFA)免疫試劑盒
Bacillus aryabhattai T調(diào)控相關(guān)蛋白抗體Human IKBKB(Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase subunit beta) ELISA Kit人胱天蛋白激活的脫氧核糖核(CAD)免疫試劑盒
熱吸水鏈霉菌突觸后蛋白CRIPT抗體Human ROMO1(Reactive oxygen species modulator 1) ELISA Kit人胱天蛋白9(Casp-9)免疫試劑盒
米曲霉鈣粘附蛋白8抗體Human THRA(Thyroid hormone receptor alpha) ELISA Kit人胱天蛋白8(Casp-8)免疫試劑盒
Bacillus tequilensis6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框174抗體Human FH(FumaRate hydRatase, mitochondrial) ELISA Kit人胱天蛋白-5(CASP5)免疫試劑盒
科氏葡萄球菌科氏亞種6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框150抗體Human GAPDH(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase) ELISA Kit人胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒
水生哈薩克斯坦酵母X染色體開(kāi)放閱讀框56抗體Human MASP1(Mannan-binding lectin serine protease 1) ELISA Kit人胱天蛋白12(Casp-12)免疫試劑盒
美味牛肝菌9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框152抗體Human LSS(Lanosterol synthase) ELISA Kit人胱天蛋白10(CASP10)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框58抗體Human IDE(Insulin-degrading enzyme) ELISA Kit人胱天蛋白1(Casp-1)免疫試劑盒
爪哇根霉接觸蛋白相關(guān)蛋白4抗體Human IFI16(Gamma-interferon-inducible protein 16) ELISA Kit人胱硫β-合(CBS)免疫試劑盒
鏈格孢CD24抗體Human KLK7(Kallikrein-7) ELISA Kit人胍基丁脲水解/凝集(AGMAT)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌接觸蛋白相關(guān)蛋白3抗體Human FPR2(N-formyl peptide receptor 2) ELISA Kit人瓜免疫試劑盒
囊毛霉CD24抗體Human ACAN(Aggrecan core protein) ELISA Kit人骨織(Ostn)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌限局性核因子3抗體Human 12-HETE(12-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit人骨形成蛋白6(BMP-6)免疫試劑盒
紅曲霉Monascus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:AR石斛酚
草生毛霉Mucor│foenicola 質(zhì)量規(guī)格:AR甘松新
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥85%(HPLC)毛蘭
JAK抑制劑(Oclacitinib)含球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪激1(Tie-1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Tie-1 ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血樣3蛋白抗體包裝250g
還原型谷胱甘肽(GSH)檢測(cè)試劑盒英文名稱:GSH ELISA Kit去整合樣金屬蛋白20抗體包裝50g
過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物(LPO)檢測(cè)試劑盒英文名稱:LPO ELISA Kit去整合樣金屬蛋白23抗體包裝2mg
過(guò)氧化物體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)檢測(cè)試劑盒英文名稱:PPAR-γ ELISA Kit去整合樣金屬蛋白28抗體包裝25g
過(guò)氧化物體增殖因子活化受體β(PPAR-β)檢測(cè)試劑盒英文名稱:PPAR-β ELISA Kit去整合樣金屬蛋白32抗體包裝5g
過(guò)氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)檢測(cè)試劑盒英文名稱:PPAR-α ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血樣4蛋白抗體包裝5g
過(guò)氧化氫(CAT)檢測(cè)試劑盒英文名稱:CAT ELISA Kit膜粘連蛋白9抗體包裝100g
過(guò)敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)檢測(cè)試劑盒英文名稱:C4a ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血15型抗體包裝25g
果糖胺(FRA)檢測(cè)試劑盒英文名稱:FRA ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血2型抗體包裝1g
胱抑C(Cys-C)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Cys-C ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血8型抗體包裝5g
胱天蛋白9(Casp-9)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Casp-9 ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血9型抗體包裝5g
胱天蛋白7(Casp-7)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Casp-7 ELISA Kit血管生成樣蛋白4抗體包裝25ml
胱天蛋白5(CASP-5)檢測(cè)試劑盒英文名稱:CASP-5 ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血10型抗體包裝5ml
胱天蛋白3(Casp-3)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Casp-3 ELISA Kit嘌呤嘧啶核內(nèi)切2抗體包裝25g
胱天蛋白10(CASP-10)檢測(cè)試劑盒英文名稱:CASP-10 ELISA Kit神經(jīng)絲蛋白抗體包裝1g