商品介紹:
Iclaprim是一種新的,有選擇性的細(xì)菌二氫葉酸抑制劑,可以抑制金黃色葡萄球菌(MRSA)的生長,其MIC90值為0.06mg/mL。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:192314-93-5 別名:AR-100 純度:98.52% 分子量:354.4 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
蒲黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Anthraquinone線粒體鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體包裝500g
蒲葵子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cynarin磷化原癌基因c-Met抗體包裝100g
七葉膽苷XVII(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1,5-Dicaffeoylquinic acid磷化絲裂原活化蛋白激激1抗體包裝25g
七葉皂苷A英文名稱: Dihydrotanshinone I甘露聚糖結(jié)合凝集絲肽1抗體包裝500g
七葉皂苷B英文名稱: Columbianadin胃動受體抗體包裝100g
七葉皂苷C英文名稱: Dihydromyricetin特異性MLT5蛋白抗體包裝25g
七葉皂苷鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dihydromyricetin軟骨基質(zhì)蛋白抗體包裝5g
榿木英文名稱: Sennoside A絲裂原活化蛋白激MKK7抗體包裝1g
漆姑草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sennoside B甘露聚糖結(jié)合凝集絲肽2抗體包裝5g
漆黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fangchinoline微小染色體維持缺陷蛋白2抗體包裝1g
齊墩果(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetrandrine微小染色體維持缺陷蛋白3抗體包裝5g
齊墩果-3-O-β-D葡萄糖( 1→3)-α-L-鼠...英文名稱: 5-Methoxypsoralen基質(zhì)金屬蛋白-26抗體包裝1g
齊墩果英文名稱: Glycyrrhetinic acid絲裂原活化蛋白激激4抗體包裝25g
奇任(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: LiquiritinMYOZ抗體包裝5g
蘄蛇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Liquiritigenin單核趨化蛋白2抗體包裝100g
彎曲芽孢桿菌Bacillus│flexus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR抗呼吸道合胞病抗體試劑盒東莨菪堿;Scopolamine
球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質(zhì)量規(guī)格:>99%抗呼吸道合胞病試劑盒大蒜;Allicin
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%抗呼吸道合胞病試劑盒丁香酚;Eugenol
細(xì)菌二氫葉酸抑制劑(Iclaprim)脂肪酰家族成員1抗體載脂蛋白E(Apo-E)檢測試劑盒Apo-E ELISA Kit
芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體載脂蛋白B48(apo-B48)檢測試劑盒apo-B48 ELISA Kit
磷化芳香N-乙?;D(zhuǎn)移抗體載脂蛋白B100(apo-B100)檢測試劑盒apo-B100 ELISA Kit
肌動蛋白結(jié)合蛋白1抗體載脂蛋白B100(Apo B100)檢測試劑盒Apo B100 ELISA Kit
粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體載脂蛋白B(ApoB)檢測試劑盒ApoB ELISA Kit
肌動蛋白結(jié)合蛋白DOC6抗體載脂蛋白A5(apo-A5)檢測試劑盒apo-A5 ELISA Kit
AFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白28抗體載脂蛋白A1(apo-A1)檢測試劑盒apo-A1 ELISA Kit
激活受體相互作用蛋白1抗體載脂蛋白A1(Apo A1)檢測試劑盒Apo A1 ELISA Kit
固類還原家族7成員A2抗體孕受體(PROGR)檢測試劑盒PROGR ELISA Kit