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線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)

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更新時間:2022-04-21 14:13:27瀏覽次數(shù):233

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T
貨號 GOY-01X9743 應用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit with JC
線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)公司正在出售的產(chǎn)品:Kv1.3/PCN3 離子通道蛋白Kv1.3抗體2,6-二氟苯酰 97%
Kv3.3/Kcnc3 離子通道蛋白Kv3.3抗體諾氟沙星 98%
KCNC4/KV3.4 離子通道蛋白Kv3.4抗體氟化,無水 AR,粉末
Laminin alpha 5 層粘蛋白α5抗體氟化,無水 GR,粉末
LAMA3/Laminin 5 alpha 3

詳細介紹

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)

Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit with JC-1

100T

1~3天

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:

線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)是一種以JC-1為熒光探針,快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,可以用于早期的細胞凋亡檢測。JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm的理想熒光探針??梢詸z測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時,JC-1聚集在線粒體的基質(zhì)中,形成聚合物,可以產(chǎn)生紅色熒光;在線粒體膜電位較低時,JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中,此時JC-1為單體,可以產(chǎn)生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降,同時也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。JC-1單體的大激發(fā)波長為515nm,大發(fā)射波長為529nm;JC-1聚合物的大激發(fā)波長為585nm,大發(fā)射波長為590nm。實際觀察時,使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設置即可。本試劑盒提供了CCCP作為誘導線粒體膜電位下降的陽性對照。對于六孔板中的樣品,本試劑盒共可以檢測100個樣品;對于12孔中的樣品,本試劑盒共可以檢測200個樣品。

儲存條件:-20℃干燥避光保存,保質(zhì)期1年

操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。

建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測:

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。

泰樂菌(標準品)英文名稱: Methocarbamol羧肽CPN2抗體包裝100g

托特羅定(標準品)英文名稱: Methocarbamol鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2D(CaMKIIδ)包裝25g

溴莫尼定(標準品)英文名稱: Methylprednisolone胞漿-5′-核苷-Ⅱ抗體包裝500g

聚乙烯(標準品)英文名稱: MethylprednisoloneCD86抗體包裝1g

決奈達(標準品)英文名稱: Mexiletine Hydrochloride周期依賴性激1抗體包裝250mg

咖啡(標準品)英文名稱: Mexiletine Hydrochloride周期依賴性激2抗體包裝100g

咖啡(進口標準品)英文名稱: Mezlocillin sodium周期依賴性激4抗體包裝25g

卡巴(標準品)英文名稱: Mezlocillin sodium周期依賴性激5抗體包裝100g

卡比多巴(標準品)英文名稱: Mifepristone1號染色體開放閱讀框200抗體包裝25g

卡鉑(標準品)英文名稱: Mifepristone6號染色體開放閱讀框223抗體包裝5g

卡洛芬(標準品)英文名稱: Mirtazapine纖維抗體包裝25g

卡絡磺鈉(標準品)英文名稱: MirtazapineC型凝集4家族E抗體包裝5g

卡莫(標準品)英文名稱: 5-Fluoroorotic acid,5-FOA蕈堿型乙酰受體抗體包裝25g

卡托普利(標準品)英文名稱: Mosapride Citrate蕈堿型乙酰受體M2抗體包裝5g

卡托普利二硫化物(標準品)英文名稱: Mosapride Citrate促進凋亡基因抗體包裝100g

AS3.852資源名稱: 日本根霉 質(zhì)量規(guī)格:含量634μg/mg-739μg/mg,BR腺病3試劑盒土貝母苷;TubeiMosideIII

淡紫擬青霉Paecilomyces│lilacinus (Thom) Samson 質(zhì)量規(guī)格:效價測定線粒體肽蛋亞砜還原試劑盒土貝母苷乙;TubeiMoside II

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP30,BR線粒體呼吸鏈復合物I 脫氫海堿;Dehydroglauci
線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)釀酒酵母 2-[4-(溴甲基)苯基]甲酯高遷移率族蛋白1Elisa

木豆根瘤 2,3,4-三羥基二苯甲酮蛋白聚糖4Elisa

毛瓣雞血藤根瘤 1-Boc-3-羥甲基吡咯烷成纖維生長因子1Elisa

鞘氨屬 2,3,6-三氟苯乙前β高密度脂蛋白Elisa

腐皮鐮孢 3-(4-)戊二酸單酰前β1高密度脂蛋白Elisa

平菇 4-溴-2,6-二叔丁基凝血因子亞基AElisa

黃色金黃桿 3-二甲氨基血小板膜蛋白CD41Elisa

長根小奧德蘑 巴氯芬CD137分子Elisa

亞膜畢赤酵母 N-叔丁氧羰基-L-焦谷氨酸芐酯表皮生長因子受體Elisa

繩狀籃狀 2,3-二氟溴芐谷氨酰2Elisa

生根根瘤 2-氯-3-甲氧基苯Sestrin 1蛋白Elisa

孢吸水鏈霉北京變種 3,4-二甲氧基苯乙酮L-天門冬氨酸Elisa

新城疫病 4-環(huán)己基磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa

黃桿 4-溴-3-氟重組人骨形成蛋白2Elisa

大腸埃希 2-氨甲基-4-(4-氟芐基)嗎啉線粒體呼吸鏈復合物IIElisa

 


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