公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):IRAK4抑制劑(IRAK inhibitor 4)
英文名稱(chēng):IRAK inhibitor 4
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
IRAK inhibitor4是白細(xì)胞介素-1受體相關(guān)激酶-4(IRAK4)的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1012104-68-5 純度:98.05% 分子量:620.66 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
糞腸球菌軟骨糖蛋白39抗體Human sTREM-1(soluble Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells-1) ELISA Kit人突觸回蛋白2(SYNJ2)免疫試劑盒
短密青霉癌胚抗原抗體Human SMN1(Survival of Motor Neuron 1, omeric) ELISA Kit人透明質(zhì)結(jié)合蛋白2(HABP2)免疫試劑盒
交鏈孢癌胚抗原相關(guān)粘附分子8抗體Human STUB1(E3 ubiquitin-protein ligase CHIP) ELISA Kit人透明質(zhì)蛋白聚糖連結(jié)蛋白1(HAPLN1)免疫試劑盒
巨大芽孢桿菌C型鈉尿肽抗體Human SMRP(Soluble Mesothelin Related Peptide) ELISA Kit人透明質(zhì)(HA)免疫試劑盒
匯合海桿菌組織蛋白K抗體Human SUMO2(Small Ubiquitin Related Modifier 2) ELISA Kit人銅鋅-過(guò)氧化物岐化(SOD1)免疫試劑盒
釀酒酵母組織蛋白D抗體Human SERT(Serotonin Transporter) ELISA Kit人銅藍(lán)蛋白(CP/CER)免疫試劑盒
粉紅擲孢酵母組織蛋白H抗體Human sFMC(Soluble Fibrin Monomer Complex) ELISA Kit人同源框A3(HOXA3)免疫試劑盒
Marisediminicola磷化鈣/鈣調(diào)依賴(lài)蛋白激2α抗體Human Anti HCV(Hepatitis C Virus Antibody) ELISA Kit人同型半胱(Hcy)免疫試劑盒
表皮葡萄球菌磷化半胱蛋白9抗體Human SIRT1(Sirtuin 1) ELISA Kit人鐵-過(guò)氧化物岐化(Fe-SOD)免疫試劑盒
乳明串珠菌磷化半胱蛋白9抗體Human SLC(Secondary Lymphoid Tissue Chemokine) ELISA Kit人鐵調(diào)25(Hepc25)免疫試劑盒
淡紫擬青霉磷化β 連環(huán)蛋白抗體Human SIRPa(Signal Regulatory Protein Alpha) ELISA Kit人鐵調(diào)(Hepc)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌磷化β 連環(huán)蛋白抗體Human RNASET2(Ribonuclease T2) ELISA Kit人鐵蛋白重鏈(FTH)免疫試劑盒
空泡單胞菌磷化β 連環(huán)蛋白抗體Human SLC16A8(Solute Carrier Family 16, Member 8) ELISA Kit人鐵蛋白(FE)免疫試劑盒
偽狂犬病陽(yáng)性血清磷化β 連環(huán)蛋白抗體Human Sec23b(protein transport protein Sec23B) ELISA Kit人天青殺/肝結(jié)合蛋白(AZU/HBP)免疫試劑盒
亨利緒方酵母造血干抗原CD133抗體Human RTN4(Reticulon 4) ELISA Kit人天門(mén)冬酰-tRNA合成(DARS)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框138抗體Human RPS6Kβ1(Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1) ELISA Kit人天門(mén)冬基轉(zhuǎn)移(AST)免疫試劑盒
乳桿菌屬Lactobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>60%,BSColl2-1 ELISA Kit富馬
慢生大豆根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRc-jun ELISA Kit腐
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BRchemerin ELISA Kit扶桑甾
IRAK4抑制劑(IRAK inhibitor 4)磷二酯4D抗體包裝1g
前纖維蛋白2抗體包裝5g
脯酰羧肽抗體包裝100ml
P2Y4受體抗體包裝25ml
瘤促活化因子3抗體包裝1g
磷脂酰乙結(jié)合蛋白1抗體包裝25g
外周蛋白抗體包裝5g
人前列腺特異性抗原單克抗體(包被)包裝1g
鼠抗人前列腺特異性抗原單克抗體(檢測(cè))包裝5g
抑制/腫瘤抑制因子抗體包裝1g
脂蛋白磷脂A2抗體包裝5g
重組金黃色葡萄球菌蛋白A抗體包裝1g
雌受體共調(diào)節(jié)因子抗體包裝1g
PSP抗體包裝5g
Pan ras抗體包裝100mg