商品介紹:
JNK-IN-7是一種有效的JNK抑制劑,抑制JNK1,JNK2和JNK3,IC50分別為1.5,2和0.7nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1408064-71-0 別名:JNK inhibitor 純度:98.39% 分子量:493.56 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
JNK抑制劑(JNK-IN-7) | JNK-IN-7 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
麥根腐平臍蠕孢周期依賴性激6抗原Anti-CDC42EP5 AntibodyPim-1原癌基因(PIM1)
黑曲霉周期依賴性激7抗原Anti-CDCA4 AntibodyPiccolo蛋白(PCLO)
枯草芽孢桿菌周期依賴性激8抗原Anti-CDCA3 AntibodyPianissimo蛋白(PIA)
枯草芽孢桿菌周期蛋白依賴激抑制因子1C抗原Anti-CDCA4 AntibodyPersephin蛋白(PSPN)
皺紋單胞菌軟骨糖蛋白39(多肽)Anti-CDCA7 AntibodyPenguin蛋白(PEN)
白葉枯病菌*抗菌肽/天蠶(多肽)Anti-CDH16 AntibodyPeflin蛋白(PEF1)
鑲邊鏈霉菌c-erbB-2受體抗原Anti-CDH20 AntibodyPDZ和LIM域蛋白1(PDLIM1)
葡萄座腔菌c-erbB-4癌基因抗原Anti-CDH22 AntibodyParalemmin3蛋白(PALM3)
大腸桿菌囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗原Anti-CDH10 AntibodyParalemmin2蛋白(PALM2)
枯草芽孢桿菌CG6856-PA抗原Anti-CDH23 AntibodyParalemmin蛋白(PALM)
穗狀平臍蠕孢嗜鉻粒A抗原Anti-CDH23 AntibodyPapilin蛋白(PAPLN)
同心環(huán)青霉嗜鉻粒B抗原Anti-CDH19 AntibodyPannexin3蛋白(PANX3)
粉肉擬層孔菌蕈堿型乙酰受體M1抗原Anti-CDH24 AntibodyPannexin2蛋白(PANX2)
大腸埃希氏菌蕈堿型乙酰受體M3抗原Anti-CDH18 AntibodyPannexin1蛋白(PANX1)
彎孢菌角蛋白18(多肽)Anti-CDH26 AntibodyPalmdelphin蛋白(PALMD)
布氏擬盤多毛孢角蛋白18多肽抗原Anti-CDH4 AntibodyPaladin蛋白(PALD)
原鈣粘蛋白β3抗體遲緩芽孢桿菌人類B細(xì)胞霍奇金淋巴瘤細(xì)胞
原鈣粘蛋白γB1抗體惡臭假單胞菌人甲狀腺正常細(xì)胞
原鈣粘蛋白γB2抗體木糖氧化產(chǎn)堿菌木糖氧化亞種人NK細(xì)胞
原鈣粘蛋白γB4抗體嗜水氣單胞菌小鼠B細(xì)胞淋巴瘤
JNK抑制劑(JNK-IN-7)熒光假單胞 尼亞希木脂苷
戊糖片球 Nyasicol
解脂亞羅酵母 Neostenine
慶笙紅球 新槐
枯草芽孢桿 Nemoralisin
鮮橙曲霉 N1,N10-雙(對(duì)香豆酰)亞精
雅致小克銀漢霉 蠟果楊梅酸 C
Nocardioides Mulberrofuran G pentaacetate
瓜果腐霉 Mulberrofuran G
木賊鐮孢 Mulberrofuran C
莫格球擬酵母 Methyl isodrimeninol
澳型核果褐腐病 Methyl demethoxycarbonylchanofru
金孢寄生 Methyl 2-(6-acetyl-5-hydroxy-2,3
雙孢蘑菇 Meridinol
堆形艾耳球蟲(chóng) Marsdenoside F