商品介紹:
英文名稱:JNK-IN-8 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg JNK-IN-8是一種有效的JNK抑制劑,抑制JNK1,JNK2和JNK3,IC50分別為4.7nM,18.7nM和1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1410880-22-6 純度:99.83% 分子式:C??H??N?O? 分子量:507.59 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
JNK抑制劑(JNK-IN-8) | JNK-IN-8 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
釀酒酵母乙?;M蛋白H2B抗體Human SLC38A1 ELISA Kit大鼠KI-67 免疫試劑盒
膠凍樣芽胞桿菌乙?;M蛋白H2B抗體Human SLC25A34 ELISA Kit大鼠Kelch樣ECH相關(guān)蛋白1(KEAP1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化組蛋白H2AX抗體Human SLC25A33 ELISA Kit大鼠I型膠原(COL1)免疫試劑盒
平田頭菇6-2磷化熱休克蛋白27抗體Human SLC25A45 ELISA Kit大鼠II型角蛋白,骨架71(KRT71)免疫試劑盒
藤黃毛殼磷化熱休克蛋白70抗體Human ATP6AP2(Renin receptor) ELISA Kit大鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1(GPBAR1)免疫試劑盒
焦曲霉磷化熱休克因子1抗體Human SLC27A2 ELISA Kit大鼠GTP KRas 免疫試劑盒
釀酒酵母磷化熱休克因子1抗體Human SLC25A46 ELISA Kit大鼠Ghrelin受體(Ghsr)免疫試劑盒
雜色云芝磷化熱休克蛋白70抗體Human SLC27A3 ELISA Kit大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)免疫試劑盒
桔青霉E3泛蛋白連接HACE1抗體Human RHOC(Rho-related GTP-binding protein RhoC) ELISA Kit大鼠F-肌動蛋白免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體Human SLC22A15 ELISA Kit大鼠FMS樣酪激3配體(Flt3L)免疫試劑盒
松口蘑肝核因子4α抗體Human SLAIN2 ELISA Kit大鼠FMS樣酪激3(Flt3)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化肝核因子4α抗體Human SLAMF7 ELISA Kit大鼠FK506結(jié)合蛋白12-雷帕霉相關(guān)蛋白1(FRAP1)免疫試劑盒
鮑魚側(cè)耳淋巴特異性解旋抗體Human SLC10A3 ELISA Kit大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)免疫試劑盒
竹針孢座囊菌HRAS樣抑制因子2抗體Human SLC12A4 ELISA Kit大鼠ERp57 免疫試劑盒
梨多細(xì)菌源菌熱休克蛋白家族40抗體Human SLC12A2(Solute carrier family 12 member 2) ELISA Kit大鼠E3-RSIκB 免疫試劑盒
嗜鹽動性球菌糖蛋白P43抗體Human SLC13A4 ELISA Kit大鼠D-乳脫氫(D-LDH)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=5%白樺脂
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus Frankland and Frankland 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%白樺脂
冰島硫化葉菌Sulfolobus│islandicus 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%羽扇豆
JNK抑制劑(JNK-IN-8)松口蘑 N,N′-二甲基-1,3-二糖聚糖Elisa
美梅奇酵母 正己褪黑Elisa
大腸埃希氏桿 正己周期AElisa
構(gòu)巢曲霉 硫酸亞銅周期BElisa
白地霉 Fmoc-O-三苯甲基-L-絲氨酸周期DElisa
阿舒假囊酵母 三(五氟苯基)烷周期EElisa
雙孢蘑菇 4--3-氟苯甲血管內(nèi)皮生長因子Elisa
橄欖產(chǎn)色鏈霉 瓜爾豆膠解物胰島Elisa
節(jié)桿 全反式-β-阿林胡蘿卜胰島樣生長因子1Elisa
小麥斑鏈格孢 六氟二酐胰高血糖Elisa
茯苓 (S)-(+)-2-[羥基(二苯基)甲基]-1-甲基吡咯烷乙酰羧化Elisa
雞傷寒沙門氏 寡霉B孕酮Elisa
蘇云金芽胞桿猝倒亞種 四氫-2H-吡喃-4-羧酸甲酯脂多糖;內(nèi)Elisa
側(cè)耳 (R)-4-芐基噻唑啉-2-硫酮脂肪甘油三酯脂Elisa
糞腸球 2,5-己二酮脂肪酸合成Elisa