商品介紹:
AR-A014418是一種有效的,選擇性的GSK3β抑制劑,IC50值為104nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):487021-52-3 別名:AR 0133418;GSK 3β inhibitor;AR 014418 純度:99.07% 分子量:308.31 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:GSK3β抑制劑(AR-A014418)
英文名稱:AR-A014418
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
冷溫木拉克酵母磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體Human KLKB1 (Plasma kallikrein) ELISA KIT人16α羥基雌1(16-α OHE-1)免疫試劑盒
奧氏蜜環(huán)菌磷化埃茲蛋白抗體Human TTPA(Alpha-tocopherol transfer protein) ELISA Kit人15-羥基前列腺脫氫(15-PGDH)免疫試劑盒
菊異莖點(diǎn)霉磷化埃茲蛋白抗體Human IQUB (IQ and ubiquitin-like domain-containing protein) ELISA KIT人15-epi-氧脂 A4(15-epi-LXA4)免疫試劑盒
白色金針菇磷化轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體Human HCRTR2 (Orexin receptor type 2) ELISA KIT人14-3-3 蛋白 beta/alpha(YWHAB)免疫試劑盒
雞傷寒沙門氏菌磷化酪蛋白激A2受體抗體Human IL1F10(Interleukin-1 family member 10) ELISA Kit人12-脂氧化/脂加氧(LOX-12)免疫試劑盒
深紅沙雷氏菌Ephrin B抗體Human ISLR (Immunoglobulin superfamily containing leucine-rich repeat protein) ELISA KIT人12羥二十烷四烯(12-HETE)免疫試劑盒
尖孢鐮孢磷化Ephrin B抗體Human IGFN1 (Immunoglobulin-like and fibronectin type III domain-containing protein 1) ELISA KIT人11-脫氧皮質(zhì)免疫試劑盒
茶藨子葡萄座腔菌磷化Ephrin B抗體Human ADRA1A(Alpha-1A adrenergic receptor) ELISA Kit人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化Ephrin B抗體Human IL1RL2 (Interleukin-1 receptor-like 2) ELISA Kit人11β羥類固脫氫1型(11β-HSD1)免疫試劑盒
奇異鏈霉菌磷化Ephrin B抗體Human ICOSLG (ICOS ligand) ELISA KIT人1,5-脫水葡萄糖/1,5-脫水山梨(1,5-AG)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬磷化雌激受體α抗體Human Anti-M3 AChR (Anti-M3 Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit人1,4,5-三磷肌(IP3)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化雌激受體α抗體Human IKBIP (Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase-interacting protein) ELISA KIT人1,3-二磷甘油(1,3-DPG)免疫試劑盒
球孢白僵菌表皮生長(zhǎng)因子受體底物8抗體Human HAGHL (Hydroxyacylglutathione hydrolase-like protein) ELISA KIT人1,25二羥基維生D3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒
灰黃淺黃酵母內(nèi)皮1抗體Human HYLS1 (Hydrolethalus syndrome protein 1 homolog) ELISA KIT人 Liprin alpha 1 免疫試劑盒
瘡痂病鏈霉菌腸道病71型/手足口病病抗體Human IPMK (Inositol polyphosphate multikinase) ELISA KIT人 KIAA1199 免疫試劑盒
Corynebacterium sp.絲裂原活化蛋白激1抗體Human HCAR2 (Hydroxycarboxylic acid receptor 2) ELISA KIT犬ELISA Kit
副豬嗜血桿菌Parasuis│Haemophilus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%棕櫚酯
羅氏擬盤多毛孢Pestalotiopsis│lespedezae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%異香蘭
黃柄曲霉Aspergillus│flavipes 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%蔗糖
GSK3β抑制劑(AR-A014418)磺加貝酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Glimepiride鈣粘附蛋白8抗體包裝1g
磺羅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Griseofulvin;Fulcin6號(hào)染色體開放閱讀框174抗體包裝5g
磺帕珠沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Griseofulvin6號(hào)染色體開放閱讀框150抗體包裝25g
磺培沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium hyaluronateX染色體開放閱讀框56抗體包裝5g
磺齊拉西(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hydrocortisone9號(hào)染色體開放閱讀框152抗體包裝25g
磺伊馬替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hydrocortisone6號(hào)染色體開放閱讀框58抗體包裝5g
基斑蝥(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ibutilide fumarate 接觸蛋白相關(guān)蛋白4抗體包裝1g
基丁香酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ibutilide fumarate CD24抗體包裝1g
基原薯蕷皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Isepamicine Sulphate接觸蛋白相關(guān)蛋白3抗體包裝100g
硫二馬尼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BexaroteneCD24抗體包裝25g
硫新斯的明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bexarotene限局性核因子3抗體包裝1g
巰咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ketoprofen胰羧肽A6抗體包裝250mg
巰咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ketoprofen9號(hào)染色體開放閱讀框150抗體包裝5g
硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ketotifen fumarate鈣粘附蛋白9抗體包裝1g
硝唑雜質(zhì)A(2-基-5-硝基咪唑)標(biāo)準(zhǔn)品英文名稱: Ketotifen fumarate鈣粘蛋白15抗體包裝5g