絲氨酸/蘇氨酸激酶Akt抑制劑公司正在出售的產(chǎn)品：DHEA-S7(Human Dehydroepiandrosterone S7) ELISA Kit 人脫氫表雄酮S7二叔丁膦 10 wt.% solution in hexanes
DHEA(Human Dehydroepiandrosterone) ELISA Kit 人脫氫表雄酮2--4-咪唑 99%
CGRP(Human calcito

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

三葉草根瘤菌增食欲A/欲激A抗體Human MMP-2(Matrix Metalloproteinase 2) ELISA Kit富亮α2糖蛋白1(LRG1)

瓜亡革菌增食欲A/欲激A抗體Human MPO(Myeloperoxidase) ELISA Kit富含半胱蛋白61(Cyr61/CCN1)

果生鏈核盤菌2'-5'-寡腺苷合成3抗體Human P-Cadherin(Cadherin, Placental) ELISA Kit復(fù)制蛋白A(RPA-70)

膠凍樣芽胞桿菌牙齒發(fā)育相關(guān)蛋白Osr2抗體Human CD26(Dipeptidyl peptidase 4) ELISA Kit復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)

*珊瑚菌（不是這個菌）胚胎干關(guān)鍵蛋白190抗體(N端)Human CLU(Clusterin) ELISA Kit附睪蛋白4(HE4)

沃氏富鹽菌起始識別復(fù)合蛋白亞基1抗體Human CD26(Dipeptidyl peptidase 4) ELISA Kit輔Q10(CoQ10)

鏈霉菌泛特異性蛋白Otubain2抗體Human MPO(Myeloperoxidase) ELISA Kit封閉抗體(BA)

節(jié)桿菌屬精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白Oligophrenin-1抗體Human CXCL1(Growth Regulated Oncogene Alpha) ELISA Kit封閉蛋白4(CLDN4)

維多利亞維希尼克氏酵母末端多聚腺苷2蛋白抗體Human CLU(Clusterin) ELISA Kit分泌性白蛋白抑制因子(SLPI)

乳乳球菌乳亞種口腔癌高表達(dá)的蛋白1抗體Human CXCL7(Plaet basic protein) ELISA Kit分泌型免疫球蛋白A(SIgA)

脫被毛球馬勃氧化固結(jié)合蛋白4抗體Human P-Cadherin(Cadherin, Placental) ELISA Kit分泌型磷脂A2(sPLA2)

貝倫格葡萄座腔菌梨生?；涂沟蛲龅鞍?/span>OLFM44抗體Human CXCL11(C-X-C motif chemokine 11) ELISA Kit分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)

釀酒酵母結(jié)腸癌過度表達(dá)蛋白1抗體Human EGF(Epidermal Growth Factor) ELISA Kit分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)

谷棒桿菌卵巢癌免疫反應(yīng)抗原抗體Human EGFR(Epidermal growth factor receptor) ELISA Kit分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)

科恩根霉卵巢癌相關(guān)基因1抗體Human CXCL9(C-X-C motif chemokine 9) ELISA Kit分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)

枯草芽孢桿菌氧化應(yīng)激誘導(dǎo)生長抑制因子1抗體Human BMP-4(Bone Morphogenetic Protein 4) ELISA Kit分泌粒蛋白1(嗜鉻粒蛋白B)(CHGB/SCG1)

乳桿菌屬Lactobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

胞內(nèi)分枝桿菌Mycobacterium│intracellulare 質(zhì)量規(guī)格：>97%

白黃側(cè)耳Pleurotus│cornucopiae 質(zhì)量規(guī)格：>85%,美國進(jìn)口
絲氨酸/蘇氨酸激酶Akt抑制劑錐形赤褶菇2-2 EC肉湯顆粒堿性磷酸Elisa

胡頹子殼囊孢 SS瓊脂顆粒降鈣Elisa

根瘤 堿性蛋白胨水顆粒降鈣原Elisa

黑木耳(黑29) 沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基顆粒膠原IElisa

枯草芽孢桿枯草亞種 月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯（LST）顆粒角蛋白16Elisa

溶桿 煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)顆粒結(jié)締組織生長因子Elisa

假單胞屬 乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基顆粒結(jié)合珠蛋白Elisa

淀粉產(chǎn)色鏈霉 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）顆粒金屬硫蛋白Elisa

枯草芽孢桿枯草亞種 鹽胱氨酸增液（SC）顆粒金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1Elisa

氈毛青霉 四硫磺酸鹽煌綠增液基礎(chǔ)（TTB）顆粒晶體蛋白αElisa

枯草芽孢桿枯草亞種 Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)顆粒晶體蛋白α抗體Elisa

紅球 7.5%肉湯顆粒精氨酸加壓Elisa

貝葉多孔 孟加拉紅培養(yǎng)基顆粒巨噬炎性蛋白-1αElisa

黑曲霉 胰蛋白胨大豆瓊脂顆?？顾嵝粤姿酔lisa

白黃小脆柄菇 腦心浸出液肉湯（BHI）顆粒抗酸性磷酸5bElisa