公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):NOS抑制劑(L-NAME hydrochloride)
英文名稱(chēng):L-NAME hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
L-NAME能抑制NOS的活性,IC50值為70μM。L-NAME是NOS抑制劑L-NOARG(IC50=1.4μM)的前體。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):51298-62-5 別名:NG-Nitroarginine methyl ester hydrochloride 純度:98.0% 分子量:269.69 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
根瘤菌腦蛋白9抗體Human PAEP(Glycodelin) ELISA Kit一氧化氮(NO)
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種絲裂原誘導(dǎo)蛋白2抗體Human PROX1 ELISA Kit葉受體α(FOLR1)
解淀粉芽孢桿菌鋅指蛋白393抗體Human PRPF19 ELISA Kit葉受體(FOLR)
枯草芽孢桿菌組蛋白賴(lài)特異性脫甲基1抗體Human PROSC ELISA Kit葉(FA)
扣囊復(fù)膜孢酵母驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體(甲狀腺激受體相互作用蛋白5)Human PRPF3 ELISA Kit氧化型(GSSG)
宇佐美曲霉組蛋白甲基化KMT3B抗體(雄激受體激活蛋白)Human ZNF335(Zinc finger protein 335) ELISA Kit氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)
黑曲霉離子通道蛋白Kv4.3抗體Human PRPF40A ELISA Kit氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)
枯草芽胞桿菌Killin-p53調(diào)節(jié)復(fù)制抑制蛋白抗體Human PRKX ELISA Kit氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)
盔狀畢赤酵母賴(lài)tRNA的連接抗體Human PRMT1 ELISA Kit氧化低密度脂蛋白(OxLDL)
大腸埃希菌220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體Human PRPF40B ELISA Kit氧還原蛋白過(guò)氧化物4(PRDX4)
嗜冷生孢八疊球菌磷化220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體Human PRPF6 ELISA Kit延伸蛋白A(EloA)
發(fā)根土壤桿菌(發(fā)根植物單胞菌)(現(xiàn)1)基爾曼氏細(xì)小病VP1/VP2抗體(大鼠潛在病KRV)C端Human PRMT5(Protein arginine N-methyltransferase 5) ELISA Kit煙酰腺嘌呤二核苷磷(NADPH)
灰毛青霉離子通道蛋白家族KCNQ1抗體Human PRMT8 ELISA Kit煙酰腺嘌呤二核苷(NAD)
褐黃木耳(琥珀木耳)組蛋白H3 K9甲基轉(zhuǎn)移抗體Human PRMT3 ELISA Kit牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)
Paenibacillus thailandensis生物鐘KAT13D蛋白抗體Human PRMT6 ELISA Kit牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)
柄籃狀菌Kelch樣蛋白36抗體Human PRPF40A ELISA Kit循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)
長(zhǎng)根小奧德蘑Xerula│radicata (Relhan) Dörfelt 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(R型)人參皂苷Rh1
人蒼白桿菌Ochrobactrum│anthropi 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)酪
多粘芽孢桿菌Bacillus│polymyxa 質(zhì)量規(guī)格:用于薄層色譜顯色劑DL-薄荷
NOS抑制劑(L-NAME hydrochloride)鰒發(fā)光桿 噻吩-2-硫二酰甘油O-酰基轉(zhuǎn)移同源物1Elisa
嗜堿迪茨氏 2--5-硝基三氟甲苯Toll樣受體1Elisa
枯草芽胞桿 β-D-葡萄糖五乙酸酯Toll樣受體6Elisa
屎腸球 9,10-二氫菲Toll樣受體10Elisa
光硬皮馬勃 1-甲哌膠原蛋白Elisa
凍土毛霉皮生變型 2-氨基-5-溴嘧啶膠原蛋白α1(Ⅰ)型Elisa
根瘤 1-芐基-3-羥基吡咯烷膠原蛋白α2(Ⅰ)型 Elisa
淡黃木層孔 1,3-二溴-5,5-二甲基海因布魯氏抗體Elisa
地衣芽孢桿 N-芐基化喹啶嗡[手性相轉(zhuǎn)移催化劑]結(jié)核桿抗體Elisa
釀酒酵母 2--4-硝苯相關(guān)糖蛋白Elisa
繩狀孢子懸浮液 2,3,4,5,6-五氟苯抗繆勒氏管Elisa
釀酒酵母 N-叔丁基二甲硅烷基-N-甲基三氟乙酰淀粉樣蛋白Elisa
米曲霉 N-叔丁基二甲硅烷基-N-甲基三氟乙酰布魯氏桿病Elisa
嗜鹽涅斯特連科氏 5,7-二-8-羥基喹啉布魯氏桿病抗體Elisa
孔狀短小莖點(diǎn)霉 均苯基磺酰循環(huán)復(fù)合物Elisa