商品介紹:
Hoechst 33258 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強烈的藍色熒光,對細胞的毒性較低。Hoechst 33258 常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測,也可以用于普通的細胞核染色,或常規(guī)的DNA染色。用于細胞核染色時,推薦的Hoechst 33258工作濃度為0.5-10μg/ml。 儲存條件:-20℃,有效期12個月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Hoechst 33258 DNA染料
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:10mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
胱天蛋白11(CASP11)英文名稱:CASP11 ELISA KitC型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員C抗體包裝25mg
胱天蛋白1(CASP1)英文名稱:CASP1 ELISA KitCD226抗體包裝25g
胱硫醚β合(CβS)英文名稱:CβS ELISA KitCD26抗體包裝5g
骨形成蛋白8B(BMP8B)英文名稱:BMP8B ELISA Kit免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ/Fc γ RII a抗體包裝5g
骨形成蛋白6(BMP6)英文名稱:BMP6 ELISA Kit緊密連接蛋白20抗體包裝1g
骨形成蛋白1(BMP1)英文名稱:BMP1 ELISA Kit中心體蛋白135抗體包裝5g
骨骼肌特異性受體酪激(MUSK)英文名稱:MUSK ELISA Kit半胱蛋白蛋白-7抗體包裝100g
骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)英文名稱:TNNT1 ELISA Kit鈣調(diào)節(jié)抗體(鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào))包裝10g
骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)英文名稱:TNNI2 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框181抗體包裝25g
骨鈣(OC)英文名稱:OC ELISA KitⅠ型補體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)包裝25mg
骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)英文名稱:BMPRⅡ ELISA Kit8型膠原/內(nèi)皮膠原蛋白抗體包裝1g
骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)英文名稱:BMPR1A ELISA Kit結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體包裝5g
骨成型蛋白7(BMP7)英文名稱:BMP7 ELISA Kit色P450 2C9抗體包裝10MG
骨成型蛋白4(BMP4)英文名稱:BMP4 ELISA Kit色P450 2D6抗體包裝100g
骨成型蛋白2(BMP2)英文名稱:BMP2 ELISA Kit血小板活化因子CTR9抗體包裝25g
特羅伊察棲砂桿菌Arenibacter│troitsensis 質(zhì)量規(guī)格:效價測定早老2試劑盒乙?;邹继J;Acetyl-trans
長柄鏈格孢Alternaria│longipes 質(zhì)量規(guī)格:>98%,合物早老1試劑盒羊藿次苷II;Icarisid II
鮑希瓦氏菌Shewanella│haliotis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于培養(yǎng)再生胰島衍生1α/胰石蛋白/胰線蛋白試劑盒茵芋苷;Skimmin
Hoechst 33258 DNA染料細孢毛霉 亞磷酸二異丁酯4-羥基苯酮酸雙加氧Elisa
匍枝根霉(黑根霉) 6-氨基-吡-2-羧酸甲酯COP9結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2Elisa
Aureimonas frigidaquae N-(3-氨基基)-N-甲基氨酸叔丁酯鹽酸鹽COP9結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2抗體Elisa
光帽鱗傘(滑菇) S-甲基-L-半胱氨酸CC趨化因子配體1Elisa
茶藨子葡萄座腔 4-溴-3,5-二氯三氟甲苯RIG-IElisa
釀酒酵母 N,N-雙(2-氯乙基)氨酸叔丁酯柯薩奇病B3Elisa
橄欖綠鏈霉 4-(二氟甲氧基)-3-(環(huán)氧基)苯甲DNA甲基轉(zhuǎn)移3A2Elisa
白僵 1,1,2,3,3-五氯烷雌受體γElisa
冬菇屬 膽固琥珀酸單酯柯薩奇病Elisa
米曲霉 3-(4-溴芐基)-2-丁基-5-氯-4-咪唑甲G_(i;o)蛋白Elisa
耐冷冷桿 Nα,Nε-雙(叔丁氧羰基)-L-賴氨酸二環(huán)己銨鹽蛋白聚糖AElisa
普通鏈霉 甲氧基去氧腎上腺鹽酸鹽蛋白聚糖BElisa
香菇 反式-4'-乙基-[1,1'-聯(lián)環(huán)己烷]-4-酮酪氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa
Paucimonas lemoignei 5-(2-甲氧基苯氧基)-[2,2-二嘧啶]-4,6(1H,5H)-二酮谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa
芽孢桿屬 2-(2-甲氧基苯氧基)二酸二甲酯補體蛋白1Elisa