Hoechst 33342細(xì)胞藍(lán)色熒光染料公司正在出售的產(chǎn)品：ATM 毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體固紅TR半化鋅鹽 90%
ATP2c1 鈣離子ATP酶通道蛋白抗體固紫B鹽 80%
phospho-ATM(Ser1981) 化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體N-酰-L-硫氨酰-L-白氨酰-L苯氨 97%
ATF6 活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體(S)-(-)-2-酰琥珀酐 90%,工業(yè)級(jí)

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

磷肌3激(PI3K)英文名稱：PI3K ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白4D抗體包裝25g

磷化腺苷活化蛋白激(pAMPK)英文名稱：pAMPK ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白9A抗體包裝5g

磷化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激(p-ERK)英文名稱：p-ERK ELISA Kit縮C抗體包裝500mg

磷化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)英文名稱：pERK ELISA Kit谷草轉(zhuǎn)抗體包裝100g

磷化酪蛋白激JAK3(pJAK3)英文名稱：pJAK3 ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體包裝25g

磷化核因子-κB(p-NF-κB)英文名稱：p-NF-κB ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體包裝500g

磷化蛋白激C(P-PKC)英文名稱：P-PKC ELISA Kit?；摎溟L(zhǎng)鏈抗體包裝25g

磷化蛋白激B(P-PKB)英文名稱：P-PKB ELISA Kit?；摎渲墟溈贵w包裝5g

磷化表皮生長(zhǎng)因子受體(pEGFR)英文名稱：pEGFR ELISA Kit酰基脫氫短鏈抗體包裝1g

磷化基末端蛋白激(P-JNK)英文名稱：P-JNK ELISA Kit過(guò)氧化物?；趸?抗體包裝25g

淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)英文名稱：Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體包裝5g

淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)英文名稱：LFA-3/CD58 ELISA Kit轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體（半胱和絲富含核蛋白1）包裝1g

亮腦啡肽(Leu-ENK)英文名稱：Leu-ENK ELISA Kit有絲分裂激A/B/C抗體包裝5g

粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)英文名稱：GM-CSF ELISA Kit蛋白酪激ATK抗體包裝1g

粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)英文名稱：G-CSF ELISA Kit長(zhǎng)鏈脂肪連接1/2抗體包裝1g

ASCL2蛋白抗體免疫球蛋白G(IgG)Torezolid (TR-701; tedizolid) is a novel oxazolidinone for gram-positive infecti
Hoechst 33342細(xì)胞藍(lán)色熒光染料雞傷寒沙門氏 2,4,6-三氯喹唑啉雌受體檢測(cè)試劑盒

三葉草根瘤 3'-氨基-4'-氟苯乙酮紅生成素檢測(cè)試劑盒

鏈霉 DL-氨酰-DL-纈氨酸促紅生成素抗體檢測(cè)試劑盒

滑菇 RS-127445 鹽酸鹽促紅生成素受體檢測(cè)試劑盒

枯草芽孢桿 1-異基-3-氨基吡咯烷促黃體檢測(cè)試劑盒

烯霉素鏈霉 Dimethylammoniumdichlorotri(mu-chloro)bis[(R)-(+)-促甲狀腺受體抗體檢測(cè)試劑盒

麥芽糖假絲酵母 4-溴-3-三氟甲基吡唑促甲素檢測(cè)試劑盒

枯草芽孢桿 1-溴-3-甲基-2-丁酮促甲狀腺素釋放檢測(cè)試劑盒

玫煙色棒束孢 2'-OMe-Ac-C亞磷酰單體促卵泡素檢測(cè)試劑盒

玉米大斑病 N-乙酰基-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-2'-甲氧基胞苷促腎上腺皮質(zhì)釋放檢測(cè)試劑盒

栗疫 4-甲基-L-苯氨酸促腎上腺皮質(zhì)檢測(cè)試劑盒

果生鏈核盤 3-甲基-4-促腎上腺皮質(zhì)釋放因子檢測(cè)試劑盒

新月彎孢 4-巰基-4-甲基-2-戊酮促生長(zhǎng)釋放檢測(cè)試劑盒

腐皮殼 2-氟-6-促胃液素檢測(cè)試劑盒

石榴干腐 4'-氨甲基-6-羧基熒光素促?；鞍讬z測(cè)試劑盒