商品介紹:
Diclofenac是COX抑制劑,對(duì)綿羊的COX-1和-2的IC50分別為60和220nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):15307-86-5 純度:99.53% 分子量:296.15 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
COX抑制劑(Diclofenac) | Diclofenac | 1mL(10mM)|5g|10g | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框93抗體Human FAM92A1 ELISA Kit兔子抗性磷5b(TRAP5b)免疫試劑盒
乳桿菌屬10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框63抗體Human FAM3D ELISA Kit兔子巨噬炎性蛋白5(MIP-5)免疫試劑盒
根瘤菌10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框132抗體Human FAM8A1 ELISA Kit兔子巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒
耐寒短桿菌10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框30抗體Human FAM40B ELISA Kit兔子巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒
齒梗孢霉10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框140抗體Human FAM160B1 ELISA Kit兔子緊密連接蛋白1(ZO1)免疫試劑盒
彩色豆馬勃1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框125抗體Human FAM160B2 ELISA Kit兔子金屬硫蛋白2(MT-2)免疫試劑盒
木蹄層孔菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框129抗體Human FAM114A1 ELISA Kit兔子結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)免疫試劑盒
布拉克須霉1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框159抗體Human FAM116B ELISA Kit兔子窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒
白禿馬勃1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框163抗體Human FAM164C ELISA Kit兔子膠原II(Collagenase II)免疫試劑盒
孢籃狀菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框172抗體Human EYA4 ELISA Kit兔子膠原I(Collagenase I)免疫試劑盒
費(fèi)希爾曲霉1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框2抗體Human EYA3 ELISA Kit兔子降鈣(CT)免疫試劑盒
大腸埃希菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框19抗體Human EZH1 ELISA Kit兔子堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)免疫試劑盒
大腸埃希菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框25抗體Human EXOSC2 ELISA Kit兔子甲狀腺(T4)免疫試劑盒
白酒 總、總酯、固形物 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框31抗體Human F4/80 ELISA Kit兔子基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒
表皮葡萄球菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框51抗體Human EYA1 ELISA Kit兔子基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)免疫試劑盒
腫囊腐霉1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框52抗體Human EYA3 ELISA Kit兔子基質(zhì)金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒
: =IFO3197資源名稱(chēng): 黃微綠鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRToll樣受體6試劑盒尿
: F31資源名稱(chēng): 腐生葡萄球菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRToll樣受體5試劑盒牛磺鵝去氧膽
暗產(chǎn)色鏈霉菌Streptomyces│phaeochromogenes 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRToll樣受體4試劑盒耐斯糖
COX抑制劑(Diclofenac)酯封端右旋聚乳(重均分子量102-137萬(wàn))英文名稱(chēng): Indobufen寡腺苷合成-1包裝10MG
酯封端右旋聚乳(重均分子量137-170萬(wàn))英文名稱(chēng): Triprolidine hydrochlorideKLHDC9蛋白抗體包裝25g
酯封端右旋聚乳(重均分子量17-26萬(wàn))英文名稱(chēng): Milrinone少突膠質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子3抗體包裝5g
酯封端右旋聚乳(重均分子量170-206萬(wàn))英文名稱(chēng): Azelaic acid螺旋轉(zhuǎn)錄因子OTP抗體包裝1g
酯封端右旋聚乳(重均分子量206-288萬(wàn))英文名稱(chēng): Perindoprilat小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗體包裝5g
酯封端右旋聚乳(重均分子量26-36萬(wàn))英文名稱(chēng): Potassium Sorbate緊密連接蛋白/小分子膠原蛋白OCEL1抗體包裝1g
酯封端右旋聚乳(重均分子量3-5.5萬(wàn))英文名稱(chēng): Betahistine mesylate富含脯突觸相關(guān)蛋白SHANK3抗體包裝25g
酯封端右旋聚乳(重均分子量36-48萬(wàn))英文名稱(chēng): Glucurolactone癌調(diào)蛋白/癌鈣蛋白抗體包裝5g
酯封端右旋聚乳(重均分子量48-73萬(wàn))英文名稱(chēng): transplatin 少突髓磷脂糖蛋白抗體包裝5g
酯封端右旋聚乳(重均分子量5.5-9萬(wàn))英文名稱(chēng): Oxalic acid樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/粘附分子樣蛋白抗體包裝100g
酯封端右旋聚乳(重均分子量73-102萬(wàn))英文名稱(chēng): Oxiconazole Nitrate外致密纖維尾部蛋白4抗體包裝25g
酯封端右旋聚乳(重均分子量9-17萬(wàn))英文名稱(chēng): Pregabalin2'-5'-寡腺苷合成2抗體包裝100g
酯封端聚乳(重均分子量0.3-1.5萬(wàn))英文名稱(chēng): [(S)-(+)-MandelicAcid] (Pregabalin impurity)µ-型受體抗體包裝25g
酯封端聚乳(重均分子量1.5-3萬(wàn))英文名稱(chēng): D-Sorbitol磷化D型受體抗體包裝5g
酯封端聚乳(重均分子量102-137萬(wàn))英文名稱(chēng): Ethylene Glycol含氧轉(zhuǎn)移1抗體包裝25g