產(chǎn)品屬性:
中文名稱:EGFR抑制劑(CO-1686)
英文名稱:CO-1686
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
CO-1686是一種可EGFR抑制劑,能夠抑制EGFRL858R/T790M和EGFRWT的活性,IC50值分別為21.5nM和303.3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1374640-70-6 別名:Rociletinib;AVL-301;CNX-419 純度:98.25% 分子量:555.55 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
印度洋硝鹽還原菌血小板源性生長(zhǎng)因子A相關(guān)蛋白2抗體Anti-IVL Antibody順烏頭2(ACO2)
肯彭貪銅菌跨膜蛋白106B抗體Anti-JAK1 Antibody順烏頭1(ACO1)
竹喙球菌微管相關(guān)蛋白Tau421抗體Anti-JAK3 Antibody順式還原加雙氧1(ADI1)
枯草芽胞桿菌瞬時(shí)受體電位通道蛋白4抗體Anti-ITPR3 Antibody水通道蛋白8(AQP8)
產(chǎn)黃青霉腫瘤/抗原44抗體Anti-JAK2 Antibody水通道蛋白7(AQP7)
黑蔥花霉癌、胃癌抗原GA55抗體Anti-ITPR1 Antibody(PB0223)水通道蛋白12B(AQP12B)
蘇云金芽孢桿菌轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β調(diào)節(jié)蛋白4抗體Anti-JAM-A/F11R Antibody水通道蛋白12(AQP12)
棘孢曲霉酪蛋白激3抗體Anti-JRK Antibody水通道蛋白11(AQP11)
金龜子綠僵菌磷化酪蛋白激3抗體Anti-JRK Antibody水通道蛋白10(AQP10)
香菇瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白1抗體(M亞家族)Anti-JUN(C-JUN) Antibody雙氧化2(DUOX2)
Talaromyces macrosporus瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白6抗體(M亞家族)Anti-JUNB Antibody雙氧化1(DUOX1)
大腸埃希氏菌跨膜蛋白2樣蛋白抗體Anti-JUND Antibody雙調(diào)蛋白B(AREGB)
香菇磷化微管相關(guān)蛋白抗體Anti-JUNB Antibody雙調(diào)蛋白(AREG)
葡萄座腔菌轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β4抗體TGF β4Anti-KBTBD2 Antibody雙特異性磷9(DUSP9)
毛柄金錢菌(金針菇)轉(zhuǎn)錄因子12抗體Anti-JUP Antibody(PB0106)雙特異性磷6(DUSP6)
白假絲酵母跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白21抗體Anti-KAT2A Antibody雙特異性磷5(DUSP5)
亞砷鹽相關(guān)蛋白抗體腐皮鐮孢菌(斜面)小鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞
液泡蛋白分選受體SORCS3抗體藍(lán)色犁頭霉小鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞
單鏈DNA結(jié)合蛋白相互作用蛋白1模仿葡萄球菌小鼠表皮黑色細(xì)胞
雙鏈RNA結(jié)合蛋白Staufen2抗體紫色紅曲菌小鼠肝成纖維細(xì)胞
EGFR抑制劑(CO-1686)沼澤考克氏 木犀草蕈堿型乙酰受體Elisa
海利斯頓氏 去氫表雄酮骨骼肌受體酪氨酸激Elisa
蘇云金芽孢桿 3,5-二羥基原肌球蛋白受體激Elisa
蠟狀芽孢桿 甘草多糖鈣-ATPElisa
聚集二疊紀(jì)桿 乙酰受體相關(guān)蛋白Elisa
毛栓孔 丹皮酚氫ATPElisa
桑黃 化二亞苯基鎓谷氨酸脫羧Elisa
香腸乳桿 α-松脂γ氨基丁酸Elisa
繩狀籃狀 α-蒎烯γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)氨Elisa
枯草芽孢桿 色P4503A4Elisa
羊毛鏈霉 鹽酸利多色P4501A1Elisa
蘋果鏈格孢 呋喃唑酮芳烴羥化Elisa
硬皮地星 L-硒代胱氨酸7-乙氧基-3一異吩惡唑酮一脫乙基Elisa
Trichococcus(可定) 呋喃西林S轉(zhuǎn)移Elisa
短小芽孢桿 異色瞞磺基轉(zhuǎn)移Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)