煙酸(NA)受體GPR109A激動(dòng)劑(MK-6892)公司正在出售的產(chǎn)品：AMPK alpha-1(phospho Ser485+Ser491) /FITC 熒光標(biāo)記化腺苷單活化蛋白激α1抗體IgG亞硝鐵化鈉 ACS, ≥99.0% (AT)
AMPK beta-1(phospho Ser108) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化腺苷單活化蛋白激β1抗體IgG苯鈉 ≥99%, FCC
A

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

福氏志賀氏菌神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種（抗原）Anti-CCDC88A AntibodySciellin蛋白(SCEL)

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌重組生長(zhǎng)分化因子8/肌肉抑制Anti-CCDC106 AntibodySATB同源框蛋白1(SATB1)

總狀毛霉原變型神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種（抗原）Anti-CCL14 AntibodySarcosynapsin蛋白(SRYP)

粗毛栓菌神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種（抗原）Anti-CCDC88A AntibodySalusinβ蛋白(Salusinβ)

米曲霉促甲狀腺受體（抗原）Anti-CCL20 AntibodySalusinα蛋白(Salusinα)

芽孢桿菌半胱蛋白8抗原Anti-CCL15 AntibodySaitohin蛋白(STH)

芽孢桿菌屬促甲狀腺受體（抗原）Anti-CCL2(MCP-1) AntibodySacsin蛋白(SACS)

枯草芽孢桿菌酪羥化（抗原）Anti-CCL20 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白B(S100B)

金色鏈霉菌微管蛋白（抗原）Anti-CCL27 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)

大腸埃希氏桿菌質(zhì)膜微囊蛋白-1抗原Anti-CCL3 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)

釀酒酵母 β-連環(huán)蛋白抗原（β-β鏈接）Anti-CCL4L1 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)

硬結(jié)節(jié)桿菌磷化β-連環(huán)蛋白抗原Anti-CCNA1 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A6(S100A6)

固氮菌微管蛋白（抗原）Anti-CCNA1 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A5(S100A5)

黃曲霉核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1(多肽)Anti-CCNA1 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A2(S100A2)

淺黃褐蠟傘組織蛋白B抗原Anti-CCNA2 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A14(S100A14)

枯草芽孢桿菌組織蛋白L抗原Anti-CCNB1 AntibodyS100鈣結(jié)合蛋白A13(S100A13)

細(xì)胞膜鈣ATP4抗體越南伯克霍爾德氏菌小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞

細(xì)胞膜鈣ATP4B抗體西伯亞庫(kù)特氏菌人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞

細(xì)胞膜鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP抗體Viridibacillusarenosi小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞

溶質(zhì)載體蛋白家族21成員2抗體Rummeliibacillusstabekisii人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞
煙酸(NA)受體GPR109A激動(dòng)劑(MK-6892)尖孢鐮刀 21-Deoxyneridienone B

小孔硬孔 20,24-Epoxy-24-methoxy- 23(24-25

嗜芽孢桿 2-O-beta-D-吡喃阿洛糖甙-2,6,16-貝殼杉烷三

黃發(fā)鏈霉 2,3-Dihydroxy-3-(4-hydroxyphenyl

蘇云金芽孢桿 2,3-Dihydroheveaflavone

旋絲毛殼 2,3-Di(3',4'-methylenedioxybenzy

玉米大斑凸臍蠕孢 2',3'-Dehydrosalannol

紅緣層孔 2,2-Dimethyl-8-prenylchromene 6

枯草芽孢桿 2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)

煙曲霉 2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan -4-

矩圓黑盤(pán)孢 1β-Hydroxyeuscaphic acid

Prauserella 1-Hydroxycanthin-6-one

Pseudomonas huaxiensis 18-Nor-4,15-dihydroxyabieta-8,11

鞘氨盒屬 16-Hydroxy-2-oxocleroda-3,13-die

野野村氏 14-Deoxy-12-hydroxyandrographoli