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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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15026555973 |
| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-21 14:12:08瀏覽次數(shù)：240
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20T|50T|100T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X9740 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱 | Caspase 1 Activity colorimetric assay Kit |
商品介紹：
本試劑盒適用于測(cè)定哺乳動(dòng)物組織、細(xì)胞caspase-1活性。測(cè)定原理基于Caspase-1特異水解其多肽底物N-acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp-pNA(Ac-YVAD-pNA)，釋放出游離的硝基pNA，后者呈黃色在405nm具有大吸收峰，用可見光分光光度比色方法測(cè)定。其吸光度值對(duì)應(yīng)于Caspase-1的水解活性。 細(xì)胞凋亡屬于程序化細(xì)胞死亡，可見于各種器官和細(xì)胞，在正常發(fā)育、生理、病理過程中對(duì)細(xì)胞和器官的穩(wěn)態(tài)具有十分重要的調(diào)節(jié)作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是參與細(xì)胞凋亡過程的蛋白酶家族，包含10多個(gè)成員。其中Caspase-1是可剪切IL-1b和IL-18前體產(chǎn)生活性細(xì)胞因子的caspase。Caspase-11剪切45kD的caspase-1前體蛋白產(chǎn)生20kD和10kD片斷，這兩個(gè)片斷可以形成異源二聚體，并進(jìn)一步形成四聚體。此四聚體具有蛋白酶活性。Caspase-1通過剪切Bcl-XL調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，并通過對(duì)細(xì)胞因子前體的剪切來調(diào)控相關(guān)細(xì)胞因子介導(dǎo)的免疫炎性反應(yīng)。 運(yùn)輸及保存：試劑常溫運(yùn)輸。到達(dá)后按要求儲(chǔ)存，1年內(nèi)穩(wěn)定。 所需儀器：酶標(biāo)儀與96孔酶標(biāo)板；或可見光分光光度計(jì)配100μl容積的石英比色杯。 工作波長(zhǎng)：大吸收波長(zhǎng)405nm，如不具備也可在400～450nm范圍內(nèi)測(cè)定，但靈敏度略降。 |
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：Caspase-1活性測(cè)定試劑盒
英文名稱：Caspase 1 Activity colorimetric assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格：20T|50T|100T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
蝶呤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Fluoxetine Hydrochloride8號(hào)染色體開放閱讀框4抗體包裝100g
蝶呤二鈉鹽 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Fluvoxamine maleateCD73抗體包裝25g
磺丁脲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Fluvoxamine maleate軸突相關(guān)粘附分子抗體包裝500g
咪唑英文名稱： Formestane6型膠原蛋白α5抗體包裝1g
咪唑（標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Formestane神經(jīng)粘附分子CALL抗體包裝5g
芬那（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Fosinopril sodium中性粒殺菌蛋白BP30抗體包裝100ml
砜霉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Furosemide21號(hào)染色體開放閱讀框56抗體包裝500ml
鈷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： FurosemideT淋巴CD1抗體包裝50ml
磺地平（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Gemfibrozil角蛋白5抗體包裝100g
磺倍他司汀（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Gemfibrozil補(bǔ)體C9a抗體包裝25g
磺達(dá)沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Gliclazide20號(hào)染色體開放閱讀框141抗體包裝1g
磺多拉司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Gliclazide20號(hào)染色體開放閱讀框160抗體包裝5g
磺多沙唑（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Glyburide/Gliebenclamide親環(huán)蛋白（親環(huán)）40抗體包裝100g
磺酚妥拉明（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Glyburide/GliebenclamideT調(diào)控相關(guān)蛋白抗體包裝25g
磺吉米沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Glimepiride突觸后蛋白CRIPT抗體包裝5g
白靈側(cè)耳（白靈菇）Pleurotus│nebrodensis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品相撲結(jié)合UBC9試劑盒無檸檬;Citric acid
季也蒙畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質(zhì)量規(guī)格：干品純度≥90.0%，干品含量≥85.0%，USP34腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白試劑盒文多靈;Vindoline
pTargetFpTargetF 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定腺苷脫試劑盒五味子;Schisandrin
Caspase-1活性測(cè)定試劑盒北方蜜環(huán) 美拉諾坦半胱氨酸蛋白9Elisa
釀酒酵母 17-AAG載脂蛋白E2Elisa
鏈霉 3-氯-4-氟苯甲糖類抗原Elisa
白地霉 Bovine adrenal medulla dodecapeptide血小板衍生生長(zhǎng)因子AAElisa
天藍(lán)褐鏈霉 4-氟-3-硝基氯芐真核翻譯起始因子4E結(jié)合蛋白1Elisa
釀酒酵母 2-甲氧基-3-連接橋粒斑珠蛋白Elisa
大腸埃希 Regorafenib (BAY 73-4506)抗鏈球溶血0Elisa
膠孢 [Arg8]-Vasotocin acetate saltF肌動(dòng)蛋白Elisa
pET-23a NVP-AUY922Talin-1Elisa
馬賽 2-甲氧基-3-硝基吡啶δ-維生EElisa
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 雙(2-甲氧乙基)氨基三氟化硫（BAST）γ-維生EElisa
擬雷氏日歸殼 1H-1,2,3-三氮唑-4-鹽酸鹽α-維生EElisa
陰溝腸桿 3,5-二氯-2-硝苯β-胡蘿卜Elisa
腸膜明串珠 -氟-4-甲基-5-硝苯黃體生成釋放Elisa
圓弧青霉 2-氯-3-氟-4-羥基吡啶溶體相關(guān)膜蛋白2抗體Elisa
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