產(chǎn)品屬性:
中文名稱:FAK抑制劑(PF-573228)
英文名稱:PF-573228
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
PF-573228是有效的和選擇性的FAK抑制劑,對FAK純化重組催化片段的IC50值為4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:869288-64-2 純度:98.72% 分子量:491.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
解脂亞羅酵母絲蛋白抑制劑B10抗體Anti-PGRMC1 Antibody(PB0825)賴酰氧化樣蛋白2(LOXL2)
擬康寧木霉5-羥色受體3C抗體Anti-PGR Antibody(PB0077)賴酰氧化樣蛋白1(LOXL1)
細鏈格孢長鏈脂肪轉(zhuǎn)運蛋白4抗體Anti-PHB Antibody賴特異性去甲基化4A(KDM4A)
蘇云金芽孢桿菌莫里遜亞種腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白9/前列腺六跨膜上皮抗原4抗體Anti-PHB2 Antibody賴tRNA合成(KARS)
發(fā)酵畢赤酵母絲/蘇蛋白激31抗體Anti-PHF21A Antibody醌型二氫蝶啶還原(QDPR)
反硝化鹽單胞菌5-羥色受體3B抗體Anti-PHEX Antibody蝰蛇(Viperin)
雙孢蘑菇SCYL結(jié)合蛋白1抗體Anti-PHLPP1 Antibody喹啉磷核糖基轉(zhuǎn)移(QPRT)
金針菇(毛柄金錢菌、冬菇))5-羥色受體2C抗體Anti-phospho-MAPT(Tau)(pSer202) Antibody快肌肌鈣蛋白C(TNNC2)
蘋果*(可換成cfcc 7946)精神障礙相關(guān)GAP蛋白抗體Anti-Phospho-Stat3(pTyr705) Antibody跨膜絲蛋白6(TMPRSS6)
矩圓黑盤孢突觸足蛋白抗體Anti-PI-16/PI16 Antibody跨膜絲蛋白4(TMPRSS4)
米曲霉CD2F-10抗體Anti-PI3 Antibody跨膜絲蛋白2(TMPRSS2)
大腸埃希菌Smad蛋白E3泛連接2抗體Anti-PI3K-gamma/PIK3CG Antibody跨膜蛋白5(TMEM5)
淺黃鏈霉菌磷化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白SCG10抗體Anti-PIAS1 Antibody跨膜蛋白2樣蛋白(TMEM2L)
蕈青霉染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白5抗體Anti-PIAS1 Antibody跨膜蛋白27(TMEM27)
寄生曲霉染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白6抗體Anti-PIAS2 Antibody跨膜蛋白2(TMEM2)
球孢白僵菌染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體Anti-PIAS3 Antibody跨膜蛋白1(TMEM1)
膜相關(guān)的蛋白質(zhì)HEM2抗體病牛沙門氏菌人膽道癌組織源細胞提取物
雄激受體復(fù)合物相關(guān)蛋白/核受體相互作用蛋白抗體腸侵襲性大腸埃希氏菌人卵巢癌組織源細胞提取物
SH2結(jié)構(gòu)域蛋白3A抗體糖丁梭菌人肝癌組織源細胞提取物
神經(jīng)上皮細胞轉(zhuǎn)化基因1抗體猴頭菌(猴頭,猴頭蘑,猴頭菇)人體胃癌組織源細胞提取物
FAK抑制劑(PF-573228)HPAF-II培養(yǎng)基 Toddaculine葡萄糖磷酸轉(zhuǎn)運蛋白Elisa
海參珊瑚寄生 Interiotherin C磷酸轉(zhuǎn)運蛋白Elisa
茄絲核 Kadsurin鐵蛋白Elisa
人型副球 Eupatoletin肉堿棕櫚?;D(zhuǎn)移Elisa
紅球 Coelonin乙酰羧化Elisa
蘇云金芽孢桿蘇云金亞種 Flavidinin過氧化物體增殖物激活受體βElisa
死亡谷芽孢桿 Murrayacarpin B肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白Elisa
米曲霉 Euchrenone B1固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1CElisa
根瘤 Euchrenone A10雷帕霉靶蛋白C1Elisa
需鈉弧 Cathayanon HAMP激活蛋白激αElisa
蘇云金芽孢桿 Hispidin核糖體S6K蛋白激Elisa
總狀共頭霉(不賣) Orobanone4E結(jié)合蛋白1Elisa
綠色木霉(暫時不提供) Curcumadionol糖皮質(zhì)Elisa
葡萄座腔 Zedoarondiol磷酸化外信號調(diào)節(jié)激Elisa
紫色桿 Curcolone谷氨酰轉(zhuǎn)Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)