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詳細介紹
產品屬性：
中文名稱：DAPI雙鏈DNA染料
英文名稱：DAPI dihydrochloride
產品規(guī)格：10mg
發(fā)貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
商品介紹：
DAPI，也稱DAPI dihydrochloride，是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，和雙鏈DNA結合后可以產生比DAPI自身強20多倍的熒光。和EB(ethidium bromide)相比，對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。因為DAPI是含有特定AT序列DNA的一種嵌入劑，它能像Hoechst染料一樣粘附在DNA雙螺旋的小溝區(qū)。盡管DAPI不能通過活細胞膜，但卻能穿透擾亂的細胞膜而對核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用來檢測酵母線粒體DNA，葉綠體DNA，病毒DNA，microplasm DNA以及染色體DNA。DAPI-DNA復合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為360nm和460nm。 DAPI染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。推薦工作濃度為0.5-10μg/ml。 CAS：28718-90-3 分子式：C16H17Cl2N5 分子量：350.25 純度：>90% (from N) 注意事項 1)DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當防護。 2)熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。 3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。 4)為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
核糖核A3(RNASE3)英文名稱：RNASE3 ELISA Kit22號染色體開放閱讀框15抗體包裝1g
核受體亞家族3C組成員1(NR3C1)英文名稱：NR3C1 ELISA Kit22號染色體開放閱讀框13抗體包裝25g
核仁(NCL)英文名稱：NCL ELISA Kit22號染色體開放閱讀框26抗體包裝5g
核仁磷蛋白(NPM)英文名稱：NPM ELISA Kit補體C2b鏈多肽抗體包裝1g
核連蛋白1(NUCB1)英文名稱：NUCB1 ELISA Kit2號染色體開放閱讀框16抗體包裝5g
核苷還原M1(RRM1)英文名稱：RRM1 ELISA Kit2號染色體開放閱讀框27抗體包裝25g
和肽(CPP)英文名稱：CPP ELISA Kit磷化δ連環(huán)蛋白抗體包裝5g
含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)英文名稱：vWA3A ELISA Kit磷化δ連環(huán)蛋白抗體包裝1g
含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)英文名稱：vWA1 ELISA Kit磷化δ連環(huán)蛋白抗體包裝5g
含銅胺氧化3(AOC3)英文名稱：AOC3 ELISA Kit磷化δ連環(huán)蛋白抗體包裝1g
含亮豐富重復蛋白3C(LRRC3C)英文名稱：LRRC3C ELISA Kit磷化δ連環(huán)蛋白抗體包裝5g
含TCP1伴侶蛋白亞基2(CCT2)英文名稱：CCT2 ELISA Kit磷化δ連環(huán)蛋白抗體包裝25g
含STIP1同源物U-框蛋白1(STUB1)英文名稱：STUB1 ELISA Kit22號染色體開放閱讀框43抗體包裝5g
含IQ基元GTP激活蛋白2(IQGAP2)英文名稱：IQGAP2 ELISA KitC2CD3蛋白抗體包裝100g
含IQ基元GTP激活蛋白1(IQGAP1)英文名稱：IQGAP1 ELISA Kit半胱蛋白蛋白14抗體包裝25g
鮑氏志賀菌Shigella│boydii 質量規(guī)格：> 99%,BR,可用于培養(yǎng)粘蛋白3試劑盒異香草;Isovanillic Aci
草螺菌屬Herbaspirillum│sp. 質量規(guī)格：>97%,BR粘蛋白2試劑盒煙堿;L-Nicotine
光黑腹菌Rhizopogon│piceus Berk. & M.A. Curtis 質量規(guī)格：HPLC>97%,標準品增殖誘導配體試劑盒3-異倒捻子;3-isomangost
DAPI雙鏈DNA染料大腸埃希 阿那曲唑抗抗體Elisa
平臍蠕孢 酸-1-苯乙酯ATP結合盒轉運體A1Elisa
紅色皺紋單胞 N-哌甲酸乙酯膽固酯轉移蛋白Elisa
平臍蠕孢 芐基三丁基三溴化銨谷氨酸脫氫Elisa
大麗花輪枝孢（棉花黃萎?。?/span> 鋯硅酸鈉萊姆病IgG抗體Elisa
七鉬酸銨胸腺β10Elisa
玫瑰紫青霉 3,4-二氯肉桂酸(反式)磷酸二酯5Elisa
Chitinophaga rupis 鎳鋁粒巨噬集落激因子抗體Elisa
棕黑腐質霉 2,5-二氟苯磺酰綠膿桿外AElisa
黑根霉 4-溴丁基苯基β氨基己糖苷Elisa
聚生殼 5,6-二甲氧基-2-(4-甲基)-1-茚酮鹽酸鹽芳香N-乙?；D移Elisa
炭疽芽胞桿 4-(5-溴-3-氯-2-吡啶基)嗎啉白酯Elisa
解淀粉芽孢桿 4-羥基扁桃酸唾液酸苷Elisa
羊肚（不能訂購） 2-氯-4-(4-氯苯氧基)苯乙酮DNA甲基化轉移Elisa
釀酒酵母 5-氨基-2-萘磺酸腸道病71型Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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