TNF-α轉(zhuǎn)換酶TACE抑制劑(TAPI-1)公司正在出售的產(chǎn)品：p53(Mouse p53/tumor protein) ELISA Kit 小鼠p53無(wú)水 AR，98%
cGMP(Mouse Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit 小鼠環(huán)鳥苷無(wú)水 分析標(biāo)準(zhǔn)品
NOS(Mouse nitric oxide synthase) ELISA Kit

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

鼠李糖乳桿菌PE-Cy7標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SPRY2 Antibody高遷移率族蛋白17(HMG17)

蠟樣芽孢桿菌Cy3標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SPHK2 Antibody高遷移率族蛋白1(HMG1)

產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型Cy5標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SPR Antibody高遷移率族ATHook蛋白2(HMGA2)

乳桿菌Cy5.5標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SPI1 Antibody高遷移率族ATHook蛋白1(HMGA1)

紫丁香蘑PE-Cy3標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SPN Antibody(PB0114)高分子量激肽原(HMWK)

嗜熱鏈球菌PE-CY5標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SPRY4 Antibody高爾基體蛋白B1(GOLGB1)

芽胞桿菌APC標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SPTLC1 Antibody高爾基體蛋白A8家族成員A(GOLGA8A)

谷棒桿菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗人IgGAnti-SQSTM1 Antibody高爾基體蛋白A7(GOLGA7)

釀酒酵母羅丹明標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SPTLC1 Antibody高爾基體蛋白A6(GOLGA6)

涎沫假絲酵母Cy5.5標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SRC Antibody高爾基體蛋白A5(GOLGA5)

英諾克李斯特菌Cy7標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SRC Antibody(PB0080)高爾基體蛋白A4(GOLGA4)

PE標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SRC Antibody高爾基體蛋白A3(GOLGA3)

爪哇根霉PE-Cy3標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SRG2 Antibody高爾基體蛋白A2(GOLGA2)

枯草芽孢桿菌PE-CY5標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SQSTM1 Antibody高爾基體蛋白A1(GOLGA1)

陳華癸氏中間根瘤菌APC標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SRD5A1 Antibody高爾基糖蛋白1(GLG1)

季也蒙有孢漢遜酵母Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗人IgMAnti-SRG4 Antibody高爾基磷蛋白3(GOLPH3)

核抑制蛋白磷1抗體拜耳接合酵母大鼠腦膜細(xì)胞提取物

G21蛋白質(zhì)抗體血紅紅曲菌大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞提取物

腈水解1抗體嗜堿芽孢桿菌大鼠牙乳頭細(xì)胞提取物

神經(jīng)腫瘤Nova2抗原抗體土壤短芽孢桿菌大鼠表皮黑色細(xì)胞提取物
TNF-α轉(zhuǎn)換酶TACE抑制劑(TAPI-1)地衣芽孢桿 BOC-L-天氨酸β-芐酯

紫色紅曲霉 竹紅

毛木耳 芴甲氧羰基-N-三苯甲基-L-天冬酰

土曲霉原變種 4',5,8-三羥基-3',6,7-氧基黃酮

蠟狀芽孢桿 延命草

維氏氣單胞 BOC-N-β-Trityl-L-天門冬酰

新生隱球 疏展香茶菜寧B

芹側(cè)耳（杏鮑菇） Nα-FMOC-Nω-PBF-D-精氨酸

苔蘚隱球酵母 8-羥基松脂

乳桿屬 小構(gòu)樹A

蘇云金芽孢桿 5,7-二甲氧基-3,3',4'-三羥基黃酮

泡盛曲霉 (-)-表松脂酚

短桿狀馬賽 環(huán)桑

屎腸球 植酸鈣

細(xì)黃鏈霉 (-)-二氫槲皮