PLK1和PLK3抑制劑（GW843682X）公司正在出售的產(chǎn)品：AKT2/FITC 熒光標(biāo)記蛋白激B2抗體IgG無水硫氫鈉 CP
phospho-Akt/FITC 熒光標(biāo)記抗化蛋白激B抗體IgG鈉 AR, ≥99.0%
CEA/Gold 膠體金標(biāo)記癌胚抗原抗體IgG鈉 CP, ≥98.0%
Aldolase A/FITC 熒光標(biāo)記縮A抗體IgG鈉 ACS, ≥99.0%
ALK/CD24

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
間型腐霉磷化鈣介質(zhì)抗原Anti-CAPN11 AntibodySnurportin1蛋白(SNUPN1)

羊泰勒蟲（張家川株-2）神經(jīng)激肽A受體（多肽抗原）Anti-CAPN12 AntibodySnail同源物1(SNAI1)

大豆慢生根瘤菌鈣蛋白（多肽）Anti-CARD10 AntibodySmoothened蛋白(SMO)

秦氏蜜環(huán)菌炎癥負(fù)調(diào)控因子蛋白（抗原）Anti-CAPN9 AntibodySmoothelin蛋白(SMTN)

豌豆根瘤菌微管相關(guān)蛋白（抗原）Anti-CARD8 AntibodySmad同源物7(Smad7)

霍斯格里蒙菌端粒（催化亞單位）（多肽抗原）Anti-CARD19 AntibodySmad同源物4(Smad4)

宇佐曲霉轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–α（抗原）Anti-CARF AntibodySmad同源物3(Smad3)

掌狀花耳鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗原Anti-CARF AntibodySmad同源物1(Smad1)

微小桿菌鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激IG抗原Anti-CARM1 AntibodySlit同源物3(Slit3)

委內(nèi)瑞鏈霉菌轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β1（抗原）Anti-CASP4 AntibodySlit同源物2(Slit2)

節(jié)桿菌屬鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2b抗原Anti-CASP5 AntibodySlit同源物1(Slit1)

環(huán)狀芽胞桿菌Park7/DJ-1/CAP1抗原Anti-CASP7 AntibodySlingshot同源物3(SSH3)

稻平臍孺孢環(huán)化相關(guān)蛋白CAP-2抗原Anti-CASZ1 AntibodySlingshot同源物2(SSH2)

生脂固氮螺菌轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2前體肽Anti-CAVIN3 AntibodySlingshot同源物1(SSH1)

枯草芽孢桿菌轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β3（抗原）Anti-CASP9 AntibodySideroflexin5蛋白(SFXN5)

植物乳桿菌植物亞種轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2（多肽抗原）Anti-CBFA2T3 AntibodySideroflexin4蛋白(SFXN4)

PGBD3蛋白抗體Phaeobacterinhibens人成神經(jīng)細(xì)胞瘤（來自骨髓）

蛋白激Cα相互作用蛋白1抗體Fulvimarinapelagi大鼠肝癌細(xì)胞

絲/蘇蛋白激5抗體Aurantimonascoralicida人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞

蛋白質(zhì)磷1G抗體PP2CγPsychrobacillusinsolitus小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
PLK1和PLK3抑制劑（GW843682X）根瘤 5,8,4'-Trihydroxy-7-methoxyflavo

球孢白僵 5,5'-Dimethoxylariciresinol

梭 5,7,3'-Trihydroxy-4'-methoxy-8-p

大麥類芽胞桿 4'-O-trans-p-Coumaroylmussaenosi

球孢白僵 4-O-Methylhelichrysetin

大蓋小皮傘 4-羥基三尖杉?jí)A

水生黃桿 4-Hydroxy-3-(3-methyl-2-butenoyl

黏瓊脂芽孢桿 4',9,9'-Trihydroxy-3'-methoxy- 3

環(huán)狀芽胞桿 4,5-Epoxyartemisinic acid

水生恩氏 4,5-Dihydroblumenol A

釀酒酵母 3-O-(E)-p-Coumaroylbetulin

詹氏酸桿 3-Isomangostin hydrate formate

溜曲霉 3-Hydroxy-5,7-dimethoxy-3',4'- m

米根霉 3-Geranyl-4-methoxybenzoic acid

茸毛褐褶 3-去氧蘇木酮 B