產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Th2細(xì)胞因子抑制劑(Suplatast Tosilate)
英文名稱:Suplatast Tosilate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Suplatast(IPD1151T)甲苯磺酸鹽是Th2細(xì)胞因子抑制劑,能降低IL-2,IL-5和IL-13的生成,但對IFN-γ的生成無效。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:94055-76-2 別名:IPD 1151T 純度:98.09% 分子量:499.64 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
猴頭兒茶酚O甲基移位抗體Human UCMA(Unique cartilage matrix-associated protein) ELISA Kit人纖維連接蛋白(cFn)免疫試劑盒
馬克斯克魯維酵母補體C1qTNF9鏈多肽抗體Human Cytochrome b-245 Beta Polypeptide ELISA Kit人外基質(zhì)磷糖蛋白(MEPE)免疫試劑盒
出芽短梗霉平滑肌鈣調(diào)蛋白CNN2抗體Human NADPH oxidase 5 ELISA Kit人色P450c21B/21-羥化(CYP21B)抗體免疫試劑盒
聚生殼菌心肌病相關(guān)蛋白2Human NEK2(Serine/threonine-protein kinase Nek2) ELISA Kit人色P450c21A/21-羥化(CYP21A)免疫試劑盒
球孢白僵菌5號染色體開放閱讀框34抗體Human HBeAg(hepatitis B virus E Antigen) ELISA Kit人色P450(CYP450)免疫試劑盒
釀酒酵母E1A激活基因激蛋白1抗體Human HBeAb(hepatitis B virus E Antibody) ELISA Kit人色c氧化亞基VIB多肽1(廣泛存在)(COX6B1)免疫試劑盒
根瘤菌2號染色體開放閱讀框42抗體Human NEK2(Serine/threonine-protein kinase Nek2) ELISA Kit人色c氧化亞基5B,線粒體(COX5B)免疫試劑盒
松口蘑豬瘟病抗體Human EZH2(Enhancer of zeste homolog 2) ELISA Kit人色c氧化亞基5A,線粒體(COX5A)免疫試劑盒
斑玉蕈3號染色體開放閱讀框54抗體Human HBcAb(hepatitis B virus Core antibody) ELISA Kit人色c氧化Ⅵα亞基多肽1(COX6A1)免疫試劑盒
醬油曲霉2號染色體開放閱讀框43抗體Human τPK1(Tau-Protein Kinase) ELISA Kit人色C氧化(COX)免疫試劑盒
釀酒酵母豬瘟病抗體Human VEGF165(Vascular Endothelial Growth Factor165) ELISA Kit人色C-1(CYC1)免疫試劑盒
蝦苗殺蝦微桿菌中心體蛋白110抗體Human VEGF-B(Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) ELISA Kit人色b561(cytb561)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌纖維Human VASPIN(Visceral Adipose Specific Serine Protease Inhibitor) ELISA Kit人絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)免疫試劑盒
根瘤菌分裂周期蛋白14B抗體Human VEGF-D(Vascular Endothelial Growth Factor D) ELISA Kit人膜DNA抗體(cmDNA)免疫試劑盒
食淀粉乳桿菌1號染色體開放閱讀框177抗體Human VIL1(Villin 1) ELISA Kit人角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)免疫試劑盒
冷海水黃桿菌1號染色體開放閱讀框183抗體Human WARS(Tryptophanyl tRNA Synthetase) ELISA Kit人角蛋白18-M65(CK 18-M65)免疫試劑盒
厚垣孢普可尼亞菌Pochonia│chlamydospora 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDNA基轉(zhuǎn)移3A試劑盒狗牙花堿D
黃暗青霉Penicillium│citreonigrum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCDNA基轉(zhuǎn)移1試劑盒高車前
瓊氏不動桿菌Acinetobacter│junii 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BPDnaJ同源亞科B成員1試劑盒廣防風(fēng)苷A
Th2細(xì)胞因子抑制劑(Suplatast Tosilate)胎盤蛋白14抗體包裝5g
磷激α1抗體包裝1g
磷化激γ1包裝25g
親環(huán)相關(guān)蛋白1抗體包裝5g
磷化激γ2包裝1g
肝糖原磷化抗體包裝5g
肌肉糖原磷化抗體包裝25g
磷羧化2抗體包裝5g
磷葡萄糖內(nèi)酯抗體包裝25ml
蛋白磷2C亞型α抗體包裝5ml
蛋白激C nu型抗體包裝1g
磷化蛋白激C nu型抗體包裝25g
磷化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體包裝5g
磷甘油脫氫抗體包裝25g
磷化泌乳抗體包裝5g
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)