商品介紹:
SCH900776是一種有效的,選擇性的Chk1抑制劑,IC50值為3nM;對CDK2和Chk2的抑制作用稍弱,IC50值分別為160nM和1500nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:891494-63-6 別名:MK-8776 純度:99.65% 分子量:376.25 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Chk1抑制劑(SCH900776)
英文名稱:SCH900776
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
慢生根瘤菌胰島樣生長因子結(jié)合蛋白樣1抗體Human PTBP2 ELISA Kit抑瘤M(OSM)
嗜松青霉免疫球蛋白D重鏈保守區(qū)抗體Human PSTPIP1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白R(hnRNP R)
膠孢IV型己糖激抗體Human PTBP1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)
大腸埃希氏菌宿主免疫球蛋白lambda樣肽1抗體Human PTCD3 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)
美澳型核果褐腐病菌NF-kappa-B抑制子beta抗體Human PTCH1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)
灰略紅鏈霉菌NF-kappa-B抑制子epsilon抗體Human PTCH2 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)
棱柱散尾菌中華變型絲/蘇蛋白激ICK抗體Human PTAFR ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白I(hnRNP I/PTB)
日內(nèi)瓦毛霉纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白172抗體Human PTBP1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)
朱紅栓菌絲/蘇蛋白激ICK抗體Human PTBP2 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)
慢生根瘤菌肽酰tRNA水解ICT1抗體Human PTCD3 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)
解脂亞羅酵母alpha干擾誘導(dǎo)蛋白27抗體Human PTCH1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)
弗氏檸檬桿菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白81抗體Human PTCH2 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)
鴨疫里氏桿菌Gamma干擾誘導(dǎo)蛋白16抗體Human PSME4 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)
焦曲霉異檸檬脫氫3 beta亞基抗體Human PSME3 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)
貽貝弧菌干擾誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白1抗體Human PSMF1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)
蘇云金芽孢桿菌異檸檬脫氫gamma亞基抗體Human PSMG2 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)
: B687資源名稱: 熒光假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)白花前胡
: T.6757F3資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(R型)人參皂苷Rh2
酵母菌Saccharomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:用于高效液相色譜標(biāo)記仙茅苷
Chk1抑制劑(SCH900776)嗜碳芽孢桿 雙烯雌酚α-酚Elisa
蝙蝠蛾擬青霉 鄰三聯(lián)苯維生B2Elisa
細(xì)鏈格孢 菲醌煙酰Elisa
葡萄座腔 異丁基酸病性腹瀉抗體Elisa
傳染性喉氣管炎病 (R)-2-(甲氧甲基)吡咯烷副結(jié)核分支桿抗體Elisa
美味側(cè)耳 5,7-二-8-羥基喹啉口蹄疫O型抗體Elisa
馬賽 2,2-二(3-氨基-4-羥苯基)六氟烷口蹄疫I型抗體Elisa
漢遜德巴利酵母漢遜變種 1-氨基-5-萘酚蓋他病抗體Elisa
果生鏈核盤 6--2-硝苯四環(huán)類Elisa
球毛殼 2,6-二苯甲β-內(nèi)酰Elisa
小馬勃 1-二氫茚酮谷轉(zhuǎn)氨Elisa
炭黑曲霉 五氟苯磺酰淀粉Elisa
類干酪乳桿 4-苯氧基纖維Elisa
盤孢 N,N-二苯基甲酰乳糖Elisa
屎腸球 乙酸對酯游離血紅蛋白Elisa