以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Mefenamic acid是非甾體抗炎化合物,為環(huán)氧化酶抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):61-68-7 純度:99.77% 分子量:241.29 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
銹赤蠟黃鏈霉菌12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體Human MFN2(Mitofusin-2) ELISA Kit人纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒
慢生根瘤菌磷化鈣調(diào)節(jié)抗體Human ILDR2(Immunoglobulin-like domain-containing receptor 2) ELISA Kit人纖維蛋白原α鏈(FGA)免疫試劑盒
釀酒酵母分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體Human NPY(Neuropeptide Y) ELISA Kit人纖維蛋白原(Fb)免疫試劑盒
泡盛曲霉磷化分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體Human VDAC1(Voltage-dependent anion-selective channel protein 1) ELISA Kit人纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)免疫試劑盒
馬沙門(mén)氏菌磷化分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體Human TP53 antibody(p53 antibody) ELISA Kit人纖溶原(Plg)免疫試劑盒
白黃馬賽菌CD3抗體Human Galactose-Deficient IgA1(Galactose-Deficient IgA1) ELISA Kit人纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒
黃曲霉CD4抗體Human ENK(Enkephalin) ELISA Kit人纖溶/纖維蛋白溶(PL/Fbn)免疫試劑盒
芽孢桿菌白共同抗原抗體Human β-actin(Beta actin) ELISA Kit人纖連蛋白(FN)自身抗體免疫試劑盒
布魯塞爾德克酵母白共同抗原抗體Human AA(Arachidonic Acid) ELISA Kit人纖連蛋白(FN)免疫試劑盒
食有機(jī)物深海芽孢桿菌白共同抗原抗體Human MBP(myelin basic protein) ELISA Kit人纖調(diào)蛋白(FMOD)免疫試劑盒
卡門(mén)柏青霉間隙連接蛋白36抗體Human ACP(Acid phosphatase) ELISA Kit人細(xì)小病B19(B19V)抗體(IgM)免疫試劑盒
Methylibium12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框61抗體Human SOCS4(Suppressor Of Cytokine Signaling 4) ELISA Kit人周期A2(Cyclin-A2)免疫試劑盒
釀酒酵母12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框63抗體Human CHAT(Choline O-acetyltransferase) ELISA Kit人周期蛋白依賴(lài)性激2(CDK2)免疫試劑盒
毛栓孔菌12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框68抗體Human HbsAg(hepatitis B virus Surface Antigen) ELISA Kit人周期蛋白A1(CCNA1)免疫試劑盒
類(lèi)芽孢桿菌屬角蛋白15抗體Human IMPDH2(Inosine 5′-Monophosphate Dehydrogenase 2) ELISA Kit人因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)免疫試劑盒
氧化節(jié)桿菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框103抗體Human TPAb(Treponema pallidum antibody) ELISA Kit人因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)免疫試劑盒
木防已盤(pán)多毛孢Pestalotia│cocculi 質(zhì)量規(guī)格:BSD二聚體試劑盒光翠雀堿
菌核青霉Penicillium│sclerotiorum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCDNA拓?fù)洚悩?gòu)1試劑盒枸櫞
稀褶黑菇Russula│nigricans (Bull.) Fr. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子4樣蛋白試劑盒狗牙花堿D乙
環(huán)氧化酶抑制劑(Mefenamic acid)3(R,S)-羥基去氧孕烯英文名稱(chēng): Ethyltriphenylphosphonium Iodide外周二氮受體抗體包裝1g
3,17β-O-二(氧基)雌二英文名稱(chēng): 1-Hexyl-2,3-dimethylimidazolium Iodide雄誘導(dǎo)增殖抑制蛋白抗體包裝5g
3,2',3',4'-四乙酰基炔雌 17-β-D-葡...英文名稱(chēng): Isopropyltriphenylphosphonium Iodide磷化絲抗體包裝100g
中心粒周蛋白抗體包裝500g
小鼠增殖核抗原單克抗體包裝1g
磷化視網(wǎng)膜母瘤樣蛋白p107抗體包裝25g
蛋白體PSMβ3抗體包裝5g
蛋白體PSMβ6抗體包裝25g
蛋白體PSMβ7抗體包裝5g
蛋白酪磷CD148抗體包裝100mg
磷化蛋白激C theta抗體包裝500mg
磷化蛋白激C theta抗體包裝100g
蛋白激C theta抗體包裝25g
磷化磷脂酰肌激PIK3-γ抗體包裝100g
磷脂酰肌激PIK3-γ抗體包裝25g