BMP抑制劑（LDN-212854）公司*的產(chǎn)品：DBC1/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠膀胱癌缺失因1抗體IgG正戊烷 AR,99%
DAPK1/FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激1抗體IgG正戊烷 農(nóng)殘級(jí)
DAPK2/FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激2抗體IgG正戊烷 for HPLC, ≥99.0%
DAPK3/FITC 熒光標(biāo)記凋亡相關(guān)蛋白激3抗體IgG正戊烷 Standa

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：BMP抑制劑（LDN-212854）

英文名稱：LDN-212854

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

釀酒酵母巨病 IgM(捕獲法一步法)Anti-MAGEC2 Antibody人腎上腺髓質(zhì)(ADM)

薄層桿菌巨病 IgM(捕獲法二步法)Anti-MAGED1 Antibody人腎上腺髓質(zhì)(ADM)

大腸埃希氏菌風(fēng)疹胞病 IgG(間接法二步法)Anti-MAGI2 Antibody人免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激(irGH)

小單孢菌風(fēng)疹胞病 IgM(間接法二步法)Anti-MAN1B1 Antibody人免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激(irGH)

枯草芽孢桿菌風(fēng)疹病 IgM(捕獲法一步法)Anti-MAP1LC3A Antibody人抗尿激/血管加壓/精加壓(ADH/VP/AVP)

洪吉氏菌人免疫球蛋白G Fc段受體ⅠAnti-MANF Antibody人抗尿激/血管加壓/精加壓(ADH/VP/AVP)

硬毛栓孔菌鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3Anti-MAP1A/MAP1B LC3 A/B Antibody人甘肽/甘(GAL)

毛頭鬼傘兔子α2抗纖溶Anti-MAP2 Antibody人甘肽/甘(GAL)

黑球漆斑菌小鼠乳脫氫Anti-MAP2K3 Antibody人促胰液/分泌受體(SR)

釀酒酵母大鼠高鐵血紅蛋白Anti-MAP2K4 Antibody人促胰液/分泌受體(SR)

氧化節(jié)桿菌風(fēng)疹胞病 IgM(捕獲法二步法)Anti-MAP2K6 Antibody人雌激受體(ER)

草菇弓形蟲(chóng)抗體 IgG(間接法二步法)Anti-MAP3K10 Antibody人雌激受體(ER)

金黃色葡萄球菌弓形蟲(chóng)抗體 IgM(間接法二步法)Anti-MAP3K13 Antibody人超敏生長(zhǎng)激(U S-GH)

球孢白僵菌弓形蟲(chóng)抗體 IgM(捕獲法一步法)Anti-MAP3K10 Antibody人超敏生長(zhǎng)激(U S-GH)

枯草芽孢桿菌弓形蟲(chóng)抗體 IgM(捕獲法二步法)Anti-MAP3K20 Antibody人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)

平菇(側(cè)5)單純皰疹Ⅰ型病 IgG(間接法二步法)Anti-MAP3K20 Antibody人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)

環(huán)指蛋白121抗體棲土曲霉成人真皮成纖維細(xì)胞

環(huán)指蛋白43抗體醬油曲霉鼠B淋巴瘤細(xì)胞

腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記蛋白2抗體寄生曲霉tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞（B類）

環(huán)指蛋白169抗體嗜熱鏈霉菌人肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞
BMP抑制劑（LDN-212854）暗紅鏈霉 馬桑亭

阿根廷假單胞 馬桑寧內(nèi)酯

矩圓黑盤(pán)孢 Corchoionoside C

赤曲霉 Corchoionol C

發(fā)酵假絲酵母 交讓木堿

玫瑰考克氏 Clerosterol glucoside

尖鐮孢古巴?；?/span> Cleroindicin F

*血紅鉚釘菇 Cleroindicin C

解淀粉芽孢桿 Cleroindicin B

貝酵母 Chinensine B

薄花邊皮傘 腦苷脂B

印度洋海源 Cerberic acid B

莖點(diǎn)霉屬 Centrolobol

枯草芽孢桿 洲茶酸

地衣芽孢桿 Caulilexin C