詳細介紹
商品介紹:
Finasteride是睪酮5α-還原酶抑制劑,Ki為10nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:98319-26-7 別名:MK-906 純度:99.55% 分子量:372.54 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
英文名稱:Finasteride
產品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
缺陷短波單胞菌Cy5.5標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOCS3 Antibody過氧化7(GPX7)
球毛殼菌Cy7標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOCS4 Antibody過氧化5(GPX5)
肉色諾卡氏菌PE標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOCS3 Antibody過氧化4(GPX4)
大奇異球菌PE-Cy3標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOCS5 Antibody過氧化1(GPX1)
枯草芽孢桿菌PE-CY5標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD1 AntibodyS轉移ω1(GSTω1)
雙孢鐮孢APC標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD2 AntibodyS轉移π1(GSTπ1)
林肯鏈霉菌Alexa Fluor 350標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD1 AntibodyS轉移μ2(GSTμ2)
毛頭鬼傘Alexa Fluor 488標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD2 Antibody(PB0454)S轉移κ1(GSTκ1)
牛奶 三聚Alexa Fluor 555標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD3 AntibodyS轉移θ2(GSTθ2)
新城疫病Alexa Fluor 647標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD3 AntibodyS轉移θ1(GSTθ1)
地下諾爾氏菌PE-Cy5.5標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOD3 AntibodyS轉移α5(GSTα5)
戊糖乳桿菌PE-Cy7標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SORBS1 AntibodyS轉移α4(GSTα4)
根瘤菌羅丹明標記的羊抗豚鼠IgGAnti-Sorbitol Dehydrogenase/SORD AntibodyS轉移α2(GSTα2)
人參地土地桿菌FITC標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SORBS3 AntibodyS轉移α1(GSTα1)
食砜節(jié)桿菌膠體金標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOX11 Antibody谷光甘肽合成(GSS)
芭蕉生粘鞭霉堿性磷(AP)標記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOX1 Antibody谷轉2(ALT2)
生長抑制蛋白NDN抗體煙色紅曲霉大鼠晶狀體上皮細胞提取物
鈉離子轉運蛋白抗體溝鯰愛德華氏菌大鼠脈絡膜血管細胞提取物
神經內分泌特異性蛋白2抗體變異庫克菌大鼠角膜成纖維細胞提取物
神經生長因子受體相關蛋白1抗體金灰青霉大鼠角膜上皮細胞提取物
睪酮5α-還原酶抑制劑(Finasteride)大豆慢生根瘤 5-甲氧基酚; 5-甲氧基莰非
酒色青霉 乙酰三鋰鹽
假單胞 (+)-異蘿芙木堿
島生異擔孔 乙氧化
纖維鏈霉 氧化
丁香假尾孢 蘿芙木明堿
費氏中華根瘤 酮酸脫羧
蜘蛛白僵 (-)-落葉松脂
短小芽孢桿 酮酸氧化
交鏈孢屬 谷草轉氨
pYes2.0 (-)-丁香樹脂酚
耶納農球 N-乙酰神經氨酸縮
芽孢桿屬 直立角茴香堿
乳桿屬 ?;铣?/span>
戈氏鏈球 異直立角茴香堿