p38α抑制劑(VX-745)公司*的產(chǎn)品：Anti-phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-PACAP/VIP receptor-I /FITC 熒光素標(biāo)記腺苷酸環(huán)化酶激活

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：p38α抑制劑(VX-745)

英文名稱：VX-745

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

1,4,7-三基啶-1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二...英文名稱： Coronene一種腫瘤抑制基因抗體（N端）包裝5g

1-(6-Chloro-9H-咔唑-2-yl)乙?；?...英文名稱： Coronene (purified by sublimation)腺苷單磷活化蛋白激α1/AMPK α 1抗體包裝1g

1-β-D-呋核亞硝尿-1,2,4-三唑-3-羧酯英文名稱： Corannulene維生K依賴的蛋白C重鏈抗體包裝5g

1-含氧的布洛芬英文名稱： 2,5-Diphenyl-1,3,4-oxadiazole神經(jīng)叢蛋白A1抗體包裝1g

1-基-煙?；镉⑽拿Q： 2,5-Di(1-naphthyl)-1,3,4-oxadiazolep21激活激4抗體包裝25g

1-基英文名稱： 9,10-Di(1-naphthyl)anthracene磷化p21激活激4/5/6抗體包裝5g

1-基吲唑-3-羧（格拉司瓊雜質(zhì)D）英文名稱： 2,3,6,7,10,11-Hexakis(hexyloxy)triphenylene磷化p21激活激1/2抗體包裝100ml

1-萘乙酰精三鹽英文名稱： Perylene磷化p21激活激1/2抗體包裝25ml

1-羥基布洛芬(布洛芬雜質(zhì)))(非對映異構(gòu)體混合物)英文名稱： Perylene (purified by sublimation)磷化p21激活激2抗體包裝5ml

1-去 2-基格拉司瓊（格拉司瓊雜質(zhì)A）英文名稱： 1,1,4,4-Tetraphenyl-1,3-butadiene磷酯Cγ2抗體包裝10g

1-去 格拉司瓊（格拉司瓊雜質(zhì)B）英文名稱： Triphenylene磷化血小板源性生長因子受體-α抗體包裝50g

1-月桂酰-3-英文名稱： meso-Tetraphenylchlorin磷化血小板源性生長因子受體-α抗體包裝100g

10-反式-阿托伐他?。ò⑼蟹ニ‰s質(zhì)AT10）((3...英文名稱： Tetraphenylporphyrin (Chlorin free)P73腫瘤抑制基因抗體包裝25g

10-反式-阿托伐他汀縮合物叔丁基酯英文名稱： 2,4,6-Triphenyl-1,3,5-triazine表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體包裝25g

10-羥基華法林(非對映異構(gòu)體混合物)英文名稱： 1,3-Diphenyl-1,3-propanedioneG蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y10抗體包裝5g

泡盛曲霉Aspergillus│awamori 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品谷胱甘肽過氧化試劑盒低聚果糖-蔗果五糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證

桔灰青霉Penicillium│aurantiogriseum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移TT試劑盒低聚果糖-蔗果四糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證

副豬嗜血桿菌Haemophilus│parasuis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,S構(gòu)型，標(biāo)準(zhǔn)品谷胱甘肽試劑盒低聚果糖-蔗果三糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證
p38α抑制劑(VX-745)自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3A/3B抗體蠟梅 6-Chloroimidazo[1,2-b]pyridazine

黃體激釋放激/促性腺激釋放激抗體辣椒,辣椒(天然提取) Adenine phosphate

LRRC23蛋白抗體辣椒,辣椒（天然提取標(biāo)準(zhǔn)品） Hypoxanthine

LRRC39蛋白抗體辣蓼（標(biāo)準(zhǔn)品） Guanine

自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體萊苞迪甙A（標(biāo)準(zhǔn)品） Guanine

L3MBTL3蛋白抗體萊苞迪甙C（標(biāo)準(zhǔn)品） Water-soluble tetrazoliuM -8;GLT008

富含亮重復(fù)蛋白25抗體萊苞迪甙D（標(biāo)準(zhǔn)品） GLT005

白介31受體a抗體萊苞迪苷G GLT004

LRSAM1蛋白抗體萊菔子（標(biāo)準(zhǔn)品） Asiatic acid 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)