ALK抑制劑(NVP-TAE 684)公司正在出售的產(chǎn)品：PKB(Mouse protein kinase B) ELISA Kit 小鼠蛋白激B對(duì)二氨苯 CP
sIgA(Mouse secretory immunoglobulin A) ELISA Kit 小鼠分泌型免疫球蛋白A對(duì)二氨苯 ACS, 99%
HO-2(Mouse heme oxygenase 2) ELISA Kit 小鼠血

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
栗疫菌生物標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SMURF2 Antibody骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)

蘇黎世干燥桿菌PE-Cy3標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SNAI1 Antibody骨骼肌肌動(dòng)蛋白α1(ACTα1)

鹽桿菌屬PE-CY5標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SMYD3 Antibody骨鈣(OC)

寄生曲霉APC標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SMURF2 Antibody骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)

假單胞菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SNAI2 Antibody(PB0443)骨成型蛋白受體1B(BMPR1B)

出芽短梗霉Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SNAI3 Antibody骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)

小單胞菌PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SNAP23 Antibody骨成型蛋白7(BMP7)

副溶血弧菌Cy3標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SNAP25 Antibody骨成型蛋白4(BMP4)

香菇Cy5標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SNRPN Antibody骨成型蛋白3(BMP3)

杰丁畢赤酵母Cy5.5標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SNAP25 Antibody骨成型蛋白2(BMP2)

大腸埃希菌Cy7標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SOCS1 Antibody骨成型蛋白10(BMP10)

香菇Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SOCS1 Antibody谷氧還蛋白5(GLRX5)

幼蟲丹絲菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗大鼠IgGAnti-SOCS2 Antibody谷氧還蛋白3(GLRX3)

榛針孢酵母辣根過氧化物標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SNRPN Antibody(PB0450)谷氧還蛋白2(GLRX2)

秦氏蜜環(huán)菌生物標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOCS3 Antibody谷氧還蛋白(GLRX)

釀酒酵母Cy5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGAnti-SOCS3 Antibody過氧化8(GPX8)

P53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制蛋白α抗體耐乳桿菌大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞提取物

胞質(zhì)5'核苷1A抗體白靈側(cè)耳（白靈菇）大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞提取物

NOC2家族樣蛋白抗體少孢酵母大鼠視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞提取物

尼曼匹克C1前體蛋白抗體白腐菌屬大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞提取物
ALK抑制劑(NVP-TAE 684)產(chǎn)氣莢膜梭       C型 1-萘-4-磺酸鈉

大腸埃希氏 草酸酰乙酯

木耳951 4-(三氟甲基)苯甲

表皮葡萄球 25-脫氫升麻 3-O-beta-D-木糖苷

葡萄汁酵母 2,4-二甲基吡咯

沙福芽孢桿 6-羥基酚 3,6,7-三葡萄糖苷

戴爾福特 5-羥色鹽酸鹽

枯草芽孢桿 5,6,7,4'-四羥基黃酮 6,7-二葡萄糖苷

拉曼傘形霉 4-乙基-2-甲氧基

猴頭 白花前胡香豆精I(xiàn)I

突尼斯葉桿 對(duì)香豆酸

大腸埃希 白花前胡香豆精I(xiàn)

球孢鏈霉 復(fù)合穩(wěn)定劑APD

玫煙色棒束孢 姜狀三七苷R1

大腸埃希氏 復(fù)合穩(wěn)定劑DPD