DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑公司*的產(chǎn)品：MMP-9/Gelatinase B(Human matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B) ELISA Kit 人質(zhì)金屬蛋白9/明膠B化銦 SP
NSE(Human Neuron-specific enolase) ELISA Kit 人神經(jīng)特異性烯化化銦 99.9% metals basis
CK-MB(H

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑

英文名稱：Idarubicin hydrochloride

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

白僵菌PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK4蛋白抗體Anti-CD3E AntibodyⅢ型膠原蛋白(COL Ⅲ)

釀酒酵母PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK7蛋白抗體Anti-CD3E AntibodyⅢ型膠原(Col Ⅲ)

大腸桿菌PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK8蛋白抗體Anti-CD36 Antibody(PB0398)Ⅱ型前膠原羧基端肽(PⅡCP)

魯考弗美奇酵母磷化蛋白酪激9抗體Anti-CD34 AntibodyⅡ型前膠原N端前肽(PⅡNP)

嗜硝假絲酵母過氧化還原5/6抗體Anti-CD3E AntibodyⅡ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)

黃硬皮馬勃過氧化還原1抗體Anti-CD3E Antibody(PB0112)Ⅱ型膠原交聯(lián)C端肽(CTX-Ⅱ)

灰離褶傘乙甲基轉(zhuǎn)移抗體Anti-CD4 AntibodyⅡ型膠原代謝產(chǎn)物C2C(C2C)

鐮孢菌（加詞待譯）前列腺F2a/PGF2 α抗體Anti-CD40 AntibodyⅡ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)

先河深海螺旋菌過氧化活化增生受體γ2抗體Anti-CD40 AntibodyⅡ型膠原(Col Ⅱ)

施氏葡萄球菌凝集亞種癌抑制基因Protor1抗體Anti-CD40 AntibodyⅡ型肺泡表面抗原(KL-6/MUC1)

孢囊放線菌端粒保護(hù)蛋白1抗體Anti-CD40 AntibodyⅠ型前膠原羧基末端前肽(PⅠCP)

香菇—SL-90前列腺癌相關(guān)蛋白2抗體Anti-CD40LG AntibodyⅠ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)

香菇天門冬甲基轉(zhuǎn)移PCMT抗體Anti-CD40 Antibody(PB1108)Ⅰ型前膠原基端肽(PⅠNP)

桃葉點(diǎn)霉腦3抗體Anti-CD40LG AntibodyⅠ型前膠原N端前肽(PⅠNP)

美澳型核果褐腐病菌蛋白酪激9抗體Anti-CD40LG AntibodyⅠ型前膠原C末端肽(CⅠCP)

泡盛曲霉胎盤特異基因8蛋白抗體Anti-CD44 AntibodyⅠ型膠原羧基端肽(ⅠCTP)

黑孢霉Nigrospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：0.98

深藍(lán)鏈霉菌Streptomyces│cyaneus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

鮑曼不動(dòng)桿菌Acinetobacter│baumannii 質(zhì)量規(guī)格：0.98
DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑宛氏擬青霉 羊鏈球培養(yǎng)基半胱氨酸蛋白3Elisa

根瘤 沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa

殺鮭氣單胞日本鮭亞種 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（USP）層粘連蛋白Elisa

緋紅密孔（不到這個(gè)種） 硫乙酸鹽流體培養(yǎng)基叉頭框蛋白O3Elisa

大腸埃希氏桿 膽鹽乳糖培養(yǎng)基(05藥典)蛋白激BElisa

釀酒酵母 乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基肝生長(zhǎng)因子Elisa

枯草芽孢桿 曙紅亞甲基藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（EMB）核心蛋白聚糖Elisa

長(zhǎng)枝木霉 四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基（TTB）肌球蛋白重鏈Elisa

米氏假單胞 沙門、志賀屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)雷帕霉靶蛋白Elisa

小孢根霉原變種 溴化十六烷基三瓊脂培養(yǎng)基磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa

紅色紅曲霉 哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基（新藥典）球蛋白AElisa

食砜節(jié)桿 假單胞瓊脂培養(yǎng)基P球蛋白GElisa

高盧蜜環(huán) 液體乳糖培養(yǎng)基母親DDP同源物2Elisa

凍土毛霉凍土變型 液體鹽胱氨酸培養(yǎng)基皮質(zhì)Elisa

雙孢小雙孢 連四硫酸鹽培養(yǎng)基神經(jīng)肽YElisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)