CDK2抑制劑(CVT-313)公司正在出售的產(chǎn)品：Cyr61/FITC 熒光標(biāo)記富半胱氨肝結(jié)合蛋白61IgG聚二單 平均分子量500
Cytochrome C/FITC 熒光標(biāo)記色 C抗體IgG1-壬烯 90%
Cytochrome P450 2C19/CYP2C19 /FITC 熒光標(biāo)記色P450 2C19抗體IgG萘 閃爍純，99%
Cytochrome P450 2C9/CYP2C9

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
木賊鐮孢乙型肝炎e抗原Anti-LPAR5 Antibody人反狀腺原(rT3)

根瘤菌乙型肝炎e抗體Anti-LRG1 Antibody人反狀腺原(rT3)

澳型核果褐腐病菌乙型肝炎核心抗體Anti-LPCAT2 Antibody人6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)

韓國(guó)假單胞菌乙型肝炎核心抗體 IgMAnti-LRP10 Antibody人6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)

蛹蟲草（北冬蟲夏草、北蟲草）（可訂購）促黃體生成Anti-LRP10 Antibody人戊糖(Pentosidine)

緊密毛霉促卵泡生成Anti-LRP3 Antibody人戊糖(Pentosidine)

固氮螺菌屬催乳Anti-LRP11 Antibody人變腎上腺(MN)

谷棒狀桿菌孕Anti-LRRC41 Antibody人變腎上腺(MN)

鞘盒菌屬游離T4Anti-LRRC41 Antibody人多巴D1受體(D1R)

堅(jiān)硬芽孢桿菌狀腺原（T3）Anti-LRRK1 Antibody人多巴D1受體(D1R)

蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種人免疫球蛋白G Fc段受體ⅡAnti-LTB Antibody人腎上腺能a1A受體(ADRA1A)

葡萄座腔菌兔粒集落激因子Anti-LTB Antibody人腎上腺能a1A受體(ADRA1A)

枯草芽孢桿菌甲狀腺（T4）Anti-LTBR Antibody人早老2(PS-2)

粉紅單端孢霉魚類主要組織相容性復(fù)合體Anti-LTO1 Antibody人早老2(PS-2)

檸檬黃色農(nóng)球菌大鼠c-Jun基末端激Anti-LTK Antibody人異腎上腺(iso-Hyd)

油菜菌核病菌小鼠絲/蘇蛋白磷Anti-LUC7L2 Antibody人異腎上腺(iso-Hyd)

畸胎瘤癌基因RAS相關(guān)抗體反曲毛殼小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞

Ras-GTP激活蛋白3抗體橄欖包毛殼大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞

RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白A抗體球毛殼L-WRN

G蛋白家族RAB21蛋白抗體長(zhǎng)刺毛殼正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞
CDK2抑制劑(CVT-313)金龜子綠僵 Eichlerianic acid

黃桿屬 Drevogenin A

鼠傷寒沙門氏 Dorsmanin A

云微所奇異球 咖啡酸二十二酯

金霉鏈霉 二氫赤松

彩色豆馬勃 Dihydroevocarpine

果生鏈核盤 Dihydrodehydrodiconiferyl alcoho

雅致栓孔 Dihydrochelerythrine

脫羧勒克氏 Dihydroajugapitin

羅伊氏乳桿 去甲氧基矢車菊黃酮

亮白曲霉 去氧鬼臼，去氧鬼臼脂

動(dòng)物雙歧桿乳亞種 去氧地膽草

德氏乳桿保加亞亞種 去氫魚藤

鮑魚側(cè)耳 去氫苦木堿

短波單胞屬 吡喃葡糖苷