商品介紹:
Enzastaurin是一種有效的PKCβ抑制劑,IC50值為6nM;對(duì)其選擇性是對(duì)PKCα,PKCγ和PKCε的6-20倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):170364-57-5 別名:LY317615 純度:99.84% 分子量:515.61 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PKCβ抑制劑(Enzastaurin) | Enzastaurin | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
多主葡萄殼菌MSH同源蛋白1樣蛋白抗體Human NT5DC1 ELISA Kit熱休克蛋白90(HSP-90)
莖點(diǎn)霉屬膜相關(guān)環(huán)指蛋白6抗體Human NRIP2 ELISA Kit熱休克蛋白72(HSP-72)
大隱球酵母基質(zhì)金屬蛋白18/19Human NT5M ELISA Kit熱休克蛋白72(HSP72)
淡紫擬青霉富含半胱蛋白質(zhì)MIG7抗體Human NRSN2 ELISA Kit熱休克蛋白70(HSP-70)
頂孢頭孢霉原癌基因絲/蘇蛋白激MOS抗體Human CRH(Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit熱休克蛋白70(HSP70)
葡萄座腔菌單核趨化誘導(dǎo)蛋白1抗體Human NPB ELISA Kit熱休克蛋白60(Hsp-60)
鑲邊鏈霉菌肌球蛋白重鏈抗體Human TATC(Thrombin-antithrombin complex) ELISA Kit熱休克蛋白60(HSP60)
砂單胞菌基質(zhì)金屬蛋白28抗體Human NR1D2 ELISA Kit熱休克蛋白40(HSP-40)
蘇云金芽孢桿菌基質(zhì)金屬蛋白23抗體Human NR2B ELISA Kit熱休克蛋白27(HSP-27)
鴨疫里氏桿菌MYC誘導(dǎo)線粒體蛋白抗體Human NR2C1(Nuclear receptor subfamily 2 group C member 1) ELISA Kit熱休克蛋白27(HSP27)
枯草芽孢桿菌粘蛋白7抗體Human NR2C2(Nuclear receptor subfamily 2 group C member 2) ELISA Kit熱休克蛋白22(HSP-22)
產(chǎn)短桿菌粘蛋白13抗體Human NRF1 ELISA Kit熱休克蛋白20(HSP-20)
粘蛋白15抗體Human NPB ELISA Kit熱休克蛋白20(HSP20)
華特拉根瘤菌基質(zhì)金屬蛋白22抗體Human NRIP2 ELISA Kit熱穩(wěn)定抗原(HSA/CD24)
芽胞桿菌肺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白抗體Human CRH(Corticotropin Releasing Hormone) ELISA Kit缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)
蠟樣芽孢桿菌候選腫瘤抑制基因MARVELD1抗體Human NR1D2 ELISA Kit缺血修飾白蛋白(IMA)
云南葡萄穗霉Stachybotrys│yunnanensis 質(zhì)量規(guī)格:pH指示劑二氫辣椒堿
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)辣椒堿
: ATCCBAA-1117資源名稱: 哈維氏弧菌 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(W)β-谷甾
PKCβ抑制劑(Enzastaurin)枯草芽孢桿 β-四氫萘酮腫瘤標(biāo)志物Elisa
白黃小脆柄菇 2-硝基-1,4-苯二腫瘤壞死因子αElisa
假木豆根瘤 1-四氫萘酮腫瘤壞死因子βElisa
土星漢遜酵母 鄰苯甲轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1Elisa
蠟樣芽胞桿 (蠟狀芽胞桿) 偏苯酸組Elisa
天藍(lán)色鏈霉 雙(2,2,6,6-四甲基-4-基)癸二酸酯組織蛋白SElisa
粘紅酵母 噻吩-2-羧酸組織型纖溶原激活劑Elisa
淺黃小孢絲鏈霉 四乙二單十二烷基組織因子Elisa
彎孢 3-(基硅基)炔組織因子途徑抑制物Elisa
釀酒酵母 4-氨基-3-鹽酸鹽巢蛋白Elisa
藤黃節(jié)桿 DL-青霉細(xì)小病抗體Elisa
巨大芽孢桿 色嗜堿性粒Elisa
肉褐鱗環(huán)柄菇 6-甲氧基喹啉肝配蛋白B2Elisa
釀酒酵母 2,7-二氨基芴弓形蟲(chóng)IgG抗體Elisa
假單胞 5--2,4-二甲氧基嘧啶弓形蟲(chóng)IgM抗體Elisa