公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Cole蘇木素染色液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml|500ml
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
用途: 常規(guī)切片染色 注意事項(xiàng): 屬于明礬蘇木素的一種,采用酒精溶液氧化,存儲(chǔ)太久后,使用時(shí)應(yīng)過(guò)濾,染色時(shí)間一般20-45分鐘。 儲(chǔ)存條件:室溫,24個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
人參皂苷Rk1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rebaudioside DMHC I類鏈相關(guān)蛋白B包裝5g
人參皂苷Rk2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Geraniin膜蛋白MLC1抗體包裝1g
人參皂苷RK3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tyrosol磷化絲裂原活化蛋白激磷-1抗體包裝250mg
人參皂苷Ro(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triptophenolide磷化絲裂原活化蛋白激磷-1抗體包裝100g
人工虎骨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Celastrol絲/蘇蛋白激MLK3抗體包裝25g
人工牛黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triptolide磷化絲/蘇蛋白激MLK3抗體包裝500g
忍冬藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triptonide有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體包裝1g
絨毛龍芽草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Acteoside磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體包裝5g
鞣花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (-)-Licarin B磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體包裝1g
肉蓯蓉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Reserpine磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體包裝1g
肉蓯蓉(管花肉蓯蓉)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Roburic acid磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激1抗體包裝250mg
肉蓯蓉苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phillyrin肌球蛋白磷抗體包裝5g
肉豆蔻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Forsythoside A磷化肌球蛋白磷抗體包裝25g
肉豆蔻木脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Forsythoside B磷化肌球蛋白磷抗體包裝5g
肉豆蔻,十四烷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Liensinine磷化肌球蛋白磷抗體包裝100g
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%抗紡錘體抗體試劑盒豆甾;Stigmasterol
窄蓋針層孔菌Phellinus│tremulae (Bondartsev) Bondartsev & P.N. Borisov 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97.0%,標(biāo)準(zhǔn)品抗二氫嘧啶相關(guān)蛋白5試劑盒膽固;Cholesterol
澳大利亞平臍蠕孢Bipolaris│australiensis 質(zhì)量規(guī)格:>97%抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體試劑盒單寧;Glycerite
Cole蘇木素染色液髓囊畢赤酵母 4--3-氟苯甲低密度脂蛋白受體Elisa
聚貪噬 3,5-二甲氧基低氧誘導(dǎo)因子-1Elisa
芽孢乳酸干粉 4-氨基-3,5-二氟低氧誘導(dǎo)因子-1αElisa
釀酒酵母 2-氟-5-(甲氧羰基)苯酸抵抗Elisa
豌豆根瘤 2-溴-5--1,4-苯二甲酸抵抗樣αElisa
微白黃鏈霉 4-吡咯烷-1-基淀粉Elisa
河北鏈霉 4-溴-1,2-二甲基-1H-咪唑淀粉樣前體蛋白Elisa
費(fèi)氏中華根瘤 4-溴-3,5-二氟苯凋亡相關(guān)因子Elisa
大腸埃希 3-氟-4-溴苯乙丁酰酯Elisa
釀酒酵母 5-氟吡啶-2-甲酰蕈堿型乙酰受體Elisa
芽枝狀枝孢 2--5-甲氧基苯鹽酸鹽端粒Elisa
葡糖酸醋桿屬 2--4-氟苯肼鹽酸鹽多巴Elisa
雜色曲霉 二乙氧羰基二酰多巴D1受體Elisa
球孢白僵 4-(4-)環(huán)己烷甲酸多巴色互變Elisa
栗疫 2-溴-6-乙酰基吡啶乙二保護(hù)兒茶酚Elisa