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詳細介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調(diào)控；
⑤細胞分化及其調(diào)控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：kFluor555-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：10T|20T|50T
發(fā)貨周期：1～3天
商品介紹：
kFlour555 Click-iT EdU 流式檢測試劑盒,細胞增殖檢測是評估細胞健康程度、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎(chǔ)實驗手段。精確的檢測細胞增殖方法是BrdU法。EdU法檢測試劑盒是brdu方法的革命性突破。EdU（5-溴-2-脫氧尿嘧啶）試劑盒是一種嘧啶類似物，可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。EdU法檢測是基于“點擊"反應，一種由銅催化的疊氮化合物和炔烴的原子共價反應。本試劑盒中，EdU試劑含有炔烴，而kFlour555染料試劑含有疊氮化合物。點擊法的EdU標記增殖快速有效，易于使用。只需少量的疊氮化染料即可非常有效地標記出整合的EdU。標準化的固定和去污劑促滲可以使檢測試劑進入細胞，而brdu方法則需要DNA變性（如酸變性、熱變性或者用Dnase消化）去暴露BrdU，從而方便BrdU抗體結(jié)合。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
無孢蛋白(ASPN)英文名稱：ASPN ELISA Kit色c氧化1抗體包裝25ml
吻受體(KISS1R)英文名稱：KISS1R ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白4抗體包裝5ml
吻1(KISS1)英文名稱：KISS1 ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體包裝1g
胃泌抑制肽(GIP)英文名稱：GIP ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白8抗體包裝5g
胃泌(GT)英文名稱：GT ELISA Kit硫軟骨抗體包裝100g
胃蛋白原C(PGC)英文名稱：PGC ELISA Kit上皮類癌相關(guān)抗原抗體包裝25g
胃蛋白原A(PGA)英文名稱：PGA ELISA Kit磷化蛋白磷激PKC/CPI-17抗體包裝5g
味覺受體1型成員2(TAS1R2)英文名稱：TAS1R2 ELISA Kit著絲粒蛋白K包裝100g
尾加壓2受體(UTS2R)英文名稱：UTS2R ELISA Kit腫瘤/抗原1B包裝25g
維生D受體(VDR)英文名稱：VDR ELISA Kit轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體包裝5g
維生D結(jié)合蛋白(DBP)英文名稱：DBP ELISA Kit8號染色體開放閱讀框K29抗體包裝1g
維生B9(VB9)英文名稱：VB9 ELISA Kit色P450 3A4抗體包裝250mg
維X受體α(RXRα)英文名稱：RXRα ELISA Kit色CYP2D1抗體包裝5g
圍脂滴蛋白4(PLIN4)英文名稱：PLIN4 ELISA KitCD33抗體包裝1g
微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移1(MGST1)英文名稱：MGST1 ELISA Kit視網(wǎng)膜母瘤結(jié)合蛋白8抗體包裝5g
彼爾姆短桿菌Brevibacterium│permense 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品組織蛋白G試劑盒風疹病IgG抗體參考品
銀耳Tremella│fuciformis 質(zhì)量規(guī)格：含量≥98.0%組織蛋白D試劑盒風疹病IgM抗體參考品
筑波鏈霉菌Streptomyces│tsukubaensis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97.0%，標準品組織蛋白C試劑盒紫堇塊莖堿;Corytuberine
kFluor555-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)雷夫松氏 1,4-二溴-2,3-二氟苯B12檢測試劑盒
白酒 酒精度 3,4,5-三氯噠維B2檢測試劑盒
桔綠木霉 2,6-吡啶二羧酸二乙酯B6檢測試劑盒
線蟲被毛孢 1-甲基-3,5-二硝基-2-吡啶酮C檢測試劑盒
枯草芽孢桿 4-氯苯乙維D檢測試劑盒
紫紅曲霉 2,4-二溴-6-氟苯維D2檢測試劑盒
釀酒酵母 2-苯乙鹽酸鹽素D3檢測試劑盒
塔賓曲霉 4-氯-3-乙基苯酚D受體檢測試劑盒
釀酒酵母 阿加曲班單水合物維E檢測試劑盒
pAAV-RC2 4-氯-2-氟苯磺酰氯維K1檢測試劑盒
蕈狀芽孢桿 己二酸二乙酯維K2檢測試劑盒
光黑腹 丁酸香茅酯尾加壓素Ⅱ相關(guān)肽檢測試劑盒
蜂房哈夫尼 酸香茅酯尾加壓素II檢測試劑盒
草木樨中華根瘤 橙花乙酸酯胃癌抗原MG7-Ag檢測試劑盒
雞葡萄球 環(huán)己烯-1-酸頻哪酯胃腸癌標志物CA199檢測試劑盒
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