MEK抑制劑(Refametinib)公司*的產(chǎn)品：ADRB1/FITC 熒光標(biāo)記腎上腺能受體β1抗體IgG二氧化硅 GR
ADRB2/FITC 熒光標(biāo)記腎上腺能受體β2抗體IgG二氧化硅 99.99% metals basis,粒徑:2μm
ADRB2(phospho Ser346)/FITC 熒光標(biāo)記化腎上腺能受體β2抗體IgG鈉 AR,99.5%
ADRB2/RBITC 羅丹明

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：MEK抑制劑(Refametinib)

英文名稱：Refametinib

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

萬壽菊鏈格孢一氧化氮合成-2（抗原）Anti-C6 AntibodyT-框蛋白3(TBX3)

乳乳球菌乳亞種蛇巴曲抗原Anti-CA1 AntibodyT-框蛋白21(TBX21)

乳乳球菌一氧化氮合成-3（抗原）Anti-CA12 AntibodyT-框蛋白2(TBX2)

豌豆根瘤菌神經(jīng)肽 Y（抗原）Anti-CA12 AntibodyT-框蛋白1(TBX1)

鏈霉菌谷受體（抗原）Anti-CA13 AntibodyTwist轉(zhuǎn)錄因子(TWIST)

紅酵母屬神經(jīng)生長因子-3（抗原）Anti-CA13 AntibodyTwist鄰位子(TWISTNB)

綠曲霉神經(jīng)生長因子4/5（抗原）Anti-CA13 AntibodyTsukushin蛋白(TSK)

叢毛單胞菌神經(jīng)生長因子（抗原）Anti-CA14 AntibodytRNA異戊基轉(zhuǎn)移1(TRIT1)

藤黃輪絲鏈霉菌Bcl-xL蛋白抗原Anti-CA14 AntibodytRNA磷轉(zhuǎn)移1(TRPT1)

擬金發(fā)蘚黏液桿菌磷化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原Anti-CA14 AntibodyTrihydrophobin1蛋白(TH1)

佛雷德里克斯堡假單胞菌丁酰脂抗原(N端)Anti-CA181 AntibodyTricellulin蛋白(TRIC)

木賊鐮孢丁酰脂抗原(C端)Anti-CA4 AntibodyTOPBP1相互作用復(fù)制激蛋白(Treslin)

白地霉核受體相關(guān)因子-1（抗原）Anti-CA5A AntibodyTomoregulin1蛋白(TR1)

血球叢赤殼胞漿-5′-核苷-ⅡAnti-CA5A AntibodyTomoregulin蛋白(TR)

熱帶假絲酵母一種抑癌基因（多肽）Anti-CA5B AntibodyToll樣受體銜接分子1(TICAM1)

蠟狀芽胞桿菌成骨生長肽 (骨生長激肽)(蛋白多肽)Anti-CA5B AntibodyToll樣受體9(TLR9)

原鈣粘附蛋白α4抗體居海洛克氏菌大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞

原鈣粘附蛋白α5抗體Aquimarinamuelleri小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞系

原鈣粘附蛋白α9抗體Shimiaisoporae人胃腺癌細(xì)胞

原鈣粘附蛋白α7抗體香港洛克氏菌甲狀腺乳頭狀細(xì)胞癌
MEK抑制劑(Refametinib)匍匐曲霉原變種 瓊脂粉

雪白紅鏈霉 二苯硫酸鹽

草螺屬 沒食子蘭

無氧芽孢桿 蛋黃

矩圓黑盤孢 大豆

哈茨木霉 大豆

紅色蠟?zāi)?/span> 雙(4-基)磷酸酯

邊緣假單胞 四甲基氟化（四水）

露濕漆斑 三癸酸三酯

麥芽香肉桿 脫脂奶粉

芽孢桿屬 I型核酸染色劑

谷棒桿Ⅲ型 十九酸

果生鏈核盤 2,2,6,6-四甲基-1-酮

暗黑橄欖色鏈霉 苯甲基-2-磺酰三硝基三氮唑

尼泊爾德巴酵母 對苯二甲酸單甲酯 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)