公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):MAP4K4抑制劑(PF-06260933)
英文名稱(chēng):PF-06260933
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
PF-06260933是一種高度選擇性的MAP4K4小分子抑制劑,在激酶實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的IC50值分別為3.7和160nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1811510-56-1 純度:99.69% 分子量:296.75 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
缺陷短波單胞菌磷化叉頭蛋白家族1抗體Human ZNF395 ELISA Kit雞煙酰腺嘌呤二核苷磷(NADPH)免疫試劑盒
微黃色芽孢桿菌叉頭蛋白O4抗體Human ZNF311 ELISA Kit雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)免疫試劑盒
尖孢鐮孢磷化叉頭蛋白4抗體Human RBL1(Retinoblastoma-like protein 1) ELISA Kit雞血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒
雞傷寒沙門(mén)氏菌FMS樣酪激3Human ZNF410 ELISA Kit雞血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫試劑盒
腐皮鐮刀菌(都只確定鐮刀屬)磷化FMS樣酪激3Human ZNF397 ELISA Kit雞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)免疫試劑盒
葉居菌磷化FMS樣酪激3Human ZNF320 ELISA Kit雞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGF-A)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化FMS樣酪激3Human RBP1(Retinol-binding protein 1) ELISA Kit雞血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化FMS樣酪激3Human ZNF326 ELISA Kit雞血管緊張Ⅰ(ANG-Ⅰ)免疫試劑盒
冷纖維單胞菌磷化c-fos抗體Human ZNF323 ELISA Kit雞新喋呤(NEOP)免疫試劑盒
根瘤菌磷化c-fos抗體Human ZNF320 ELISA Kit雞新城疫病(NDV)抗體免疫試劑盒
盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢磷化c-fos抗體Human ZNF323 ELISA Kit雞維生H(VH)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌缺氧誘導(dǎo)因子1α抑制蛋白抗體Human ZNF326 ELISA Kit雞維生D結(jié)合蛋白(VDBP)免疫試劑盒
釀酒酵母肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(N端)Human ZNF24 ELISA Kit雞褪黑(MT)免疫試劑盒
樺剝管菌補(bǔ)體因子H抗體Human ZNF251 ELISA Kit雞透明質(zhì)(HA)免疫試劑盒
放射形根瘤菌促卵泡激抗體Human ZNF256 ELISA Kit雞銅藍(lán)蛋白(CP)免疫試劑盒
細(xì)黃鏈霉菌神經(jīng)元核抗原抗體Human ZNF253 ELISA Kit雞天門(mén)冬基轉(zhuǎn)移(AST)免疫試劑盒
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Hederacolchiside E
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.7%(GC)苦蘇花皂苷C
雞傷寒沙門(mén)氏菌Salmonella│gallinarum 質(zhì)量規(guī)格:100mg/L,基體: 5%HNO3hederagenin 3-O-α-L-
MAP4K4抑制劑(PF-06260933)鹽地芬尼多(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Neochlorogenic acid雙特異性酪磷化調(diào)節(jié)激DYRK2抗體包裝25g
鹽地芬尼多雜質(zhì)(烯化合物)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ivabradine HCl鋅指結(jié)構(gòu)蛋白20抗體包裝5g
鹽地美環(huán);去基金霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): XanthophyllC型凝集受體CLEC13A抗體包裝25ml
鹽地匹福林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Xanthophyll雙基精解2抗體包裝5ml
鹽地匹福林雜質(zhì)A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): XanthophyllD酪激衰減蛋白1抗體包裝100ml
鹽?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ticagrelor雙特異性酪磷化調(diào)節(jié)激3抗體包裝25ml
鹽丁雜質(zhì)(對(duì)丁基)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ticagrelor肌營(yíng)養(yǎng)蛋白α抗體包裝500ml
鹽丁咯地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ramosetron HCl多巴β羥化抗體包裝1g
鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sevelamer HCl抑癌基因抗體包裝250mg
鹽度洛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sevelamer carbonateDNA基轉(zhuǎn)移1抗體包裝5g
鹽多巴酚丁雜質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): NifuroxazideDNA基轉(zhuǎn)移-3α抗體包裝1g
鹽多柔比星/鹽阿霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): NifuroxazideDNA基轉(zhuǎn)移-3β抗體包裝5g
鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Cepharanthine死亡受體3抗體包裝5g
鹽多沙普侖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Cepharanthine死亡受體4抗體包裝1g
鹽多佐;鹽杜塞酰(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Caspofungin Acetate精神分裂癥易感基因抗體包裝250mg