公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:mTOR和DNA-PK抑制劑(CC-115)
英文名稱:CC-115
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
CC-115抑制mTOR和DNA-PK,IC50分別為21nM和13nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1228013-15-7 純度:95.01% 分子量:336.35 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
大腸埃希菌毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗原Anti-BTC AntibodyVav1癌基因(VAV1)
枯草芽孢桿菌活化轉(zhuǎn)錄因子6抗原Anti-BTN3A1 AntibodyVasorin蛋白(VASN)
大豆慢生根瘤菌鈉ATP通道蛋白抗原Anti-BTF3L4 AntibodyVang樣蛋白2(VANGL2)
細(xì)黃鏈霉菌ATP敏感性通道亞基kir6.2抗原Anti-BUB1B AntibodyUSP6基端樣蛋白(USP6NL)
河北木霉精加壓受體2抗原Anti-BUD31 AntibodyUL16結(jié)合蛋白2(ULBP2)
黑曲霉光激B抗原Anti-C1QB AntibodyUDP葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移(UGCG)
馬桑殼針孢*孤菲肽(痛敏肽)(抗原)Anti-C1QC AntibodyUDP葡糖基轉(zhuǎn)移1家族多肽A1(UGT1A1)
程序性死亡配體1(多肽)Anti-C1QL2 AntibodyUDP半乳糖-4-差向異構(gòu)(GALE)
蘋果盤二孢孤菲肽受體(痛敏肽受體)(抗原)Anti-C1QL2 AntibodyT-免疫調(diào)節(jié)因子1(TCIRG1)
鏈霉菌軸索過度生長(zhǎng)抑制因子-A(抗原)Anti-C1S AntibodyT-可誘導(dǎo)共激分子配體(ICOSLG)
二孢接合酵母軸索過度生長(zhǎng)抑制因子受體(多肽抗原)Anti-C2CD6 AntibodyT-可誘導(dǎo)共激分子(ICOS)
粗毛擬革蓋菌相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗原Anti-C3AR1 AntibodyT-激活連接蛋白(LAT)
澳型核果褐腐病菌相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗原Anti-C5orf13 AntibodyT-白血病/淋巴瘤蛋白1A(TCL1A)
尖孢鐮刀菌磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體Anti-C4A AntibodyT-框蛋白6(TBX6)
短小芽孢桿菌Bcl-2同源拮抗劑Bak(多肽)Anti-C5AR1 AntibodyT-框蛋白5(TBX5)
黃色毛霉一氧化氮合成-1(抗原)Anti-C8B AntibodyT-框蛋白4(TBX4)
原鈣粘附蛋白20抗體Loktanellafryxellensis人burkitt淋巴瘤細(xì)胞
原鈣粘附蛋白8抗體Shimiamarina小鼠腎癌細(xì)胞
原鈣粘附蛋白α1抗體Marivitalitorea正常星形膠質(zhì)細(xì)胞
原鈣粘附蛋白α3抗體Gramellaportivictoriae小鼠胰腺癌細(xì)胞
mTOR和DNA-PK抑制劑(CC-115)釀酒酵母 磺噻唑
倚麗穗霉 辛二酸二乙酯
海南吉爾霉 D-對(duì)羥基苯甘
青枯假單胞 4,5-二熒光
枯草芽孢桿 1-羥基苯并三唑
空腸彎曲桿 無(wú)氨基酵母氮源(YNB)
熱紅短芽孢桿 熊果苷
豬肺炎支原體 5-硝基愈創(chuàng)木鈉
擬郎比可假絲酵母 2,6-二甲氧基-β-環(huán)糊精
宇佐曲霉 印度墨水
黃綠墨耳 鹽酸二甲雙胍
孟氏假單胞 田菁膠
溴化底翁
亨氏柄桿 一步法總RNA提取試劑
傳染性法氏囊病病 牛膽鹽