產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg |
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貨號 | GOY-01X10901 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱 | KPT-8602 |
Big ET(Mouse Big Endothelin) ELISA Kit 小鼠大內(nèi)皮硫鈷,七水 AR,99.5%
F VIII -Ag(Mouse coagulation fac
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15026555973 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2022-05-11 08:51:03瀏覽次數(shù):278
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg |
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貨號 | GOY-01X10901 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱 | KPT-8602 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
KPT-8602 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
KPT-8602是一個第二代的exportin-1抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1642300-52-4 純度:99.68% 分子量:428.29 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
釀酒酵母Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLIT1 Antibody胱天蛋白7(CASP7)
大腸埃希氏桿菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLK Antibody胱天蛋白6(CASP6)
綠色木霉Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLK Antibody胱天蛋白5(CASP5)
棘青霉PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SMAD1 Antibody胱天蛋白4(CASP4)
大腸埃希氏桿菌PE-Cy7標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SMAD1 Antibody胱天蛋白3(CASP3)
茄鏈格孢Cy7標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLPI Antibody胱天蛋白2(CASP2)
冠突曲霉堿性磷(AP)標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-Smad1/2/3/5 Antibody胱天蛋白14(CASP14)
哈茨木霉膠體金標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-Smad1/2/3/5 Antibody胱天蛋白12(CASP12)
格氏李斯特氏菌Cy5.5標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-Smad1/2/3/5 Antibody胱天蛋白11(CASP11)
魯考弗美奇酵母堿性磷(AP)標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD1/5 Antibody胱天蛋白1(CASP1)
紅色游動微菌FITC標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-Smad1/5 Antibody光導(dǎo)蛋白(PDC)
大豆慢生根瘤菌PE-Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD2 Antibody冠蛋白7(CORO7)
少根根霉Cy5標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD2/3 Antibody冠蛋白6(CORO6)
Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD3 Antibody冠蛋白2B(CORO2B)
假單胞菌Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD3 Antibody冠蛋白2A(CORO2A)
Rhizobium multihospitiumAPC標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SMAD2 Antibody冠蛋白1C(CORO1C)
富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體大孢地霉大鼠子宮頸上皮細(xì)胞提取物
富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體赤曲霉大鼠腎管狀上皮細(xì)胞提取物
核仁蛋白3抗體產(chǎn)紅青霉大鼠輸尿管上皮細(xì)胞提取物
核孔蛋白1抗體紅色紅曲大鼠尿道上皮細(xì)胞提取物
exportin-1抑制劑(KPT-8602)釀酒酵母 對乙酰氨基酚
楊柳毛栓 1,2-二羥基-3-甲基蒽醌
短小芽孢桿 2,1,3-苯并噻二唑
東北擬青霉 Trans-咖啡酸
小孢根霉華變種 硫酸鋁
巨型艾美耳球蟲 16-氧代澤瀉A
海水芽孢桿 磷酸氫氨鈉
白靈側(cè)耳 5,6-二甲苯并咪唑
繩狀籃狀 澤瀉 E 23-醋酸酯
乳酸片球 5-乙?;?2-溴吡啶
膠韌革 澤瀉C
彎曲芽孢桿 香草酸
無色桿 澤瀉 A 23-醋酸酯
溫特曲霉原變種 三(3-磺酸鈉基苯基)膦
黑曲霉 雞屎藤次苷