公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:TNKS2抑制劑(NVP-TNKS656)
英文名稱:NVP-TNKS656
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
NVP-TNKS656是一種有效的,選擇性的TNKS2抑制劑,IC50值為6nM,是PARP1和PARP2的選擇性的300多倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1419949-20-4 別名:TNKS656 純度:99.14% 分子量:494.58 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
棕色固氮菌p53凋亡激蛋白1抗原Anti-BLZF1 AntibodyV-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病癌基因同源物B(RELB)
肉色迷孔菌P53凋亡激蛋白2抗原Anti-BPIFA4P AntibodyV-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病癌基因同源物A(RELA)
PL101百平神經(jīng)束蛋白-155Anti-BRD3 AntibodyV-Myc骨髓瘤病癌基因同源物(MYC)
解淀粉芽孢桿菌神經(jīng)生長因子-β(多肽片斷抗原)Anti-BRCA1 AntibodyV-Myb髓組織增生病癌基因同源物(MYB)
釀酒酵母血管緊張I抗原Anti-BPIFA4P AntibodyV-Maf肌肉腱膜纖維肉瘤癌基因同源物(MAF)
枯草芽孢桿菌神經(jīng)生長因子受體(抗原)Anti-BRD4 AntibodyV-Ki-Ras2Kirsten大鼠肉瘤病癌基因同源物(KRAS)
帚復(fù)孢枝接霉血管緊張Ⅱ-1型受體抗原Anti-BRE AntibodyV-Jun肉瘤病癌基因同源物(JUN)
擬郎比可假絲酵母血管緊張Ⅱ-1型受體抗原Anti-BRF1 AntibodyVI型膠原(COL6)
不解糖假蒼白桿菌NFkB誘導(dǎo)的激(抗原)Anti-BRF1 AntibodyV-Ha-Ras肉瘤病癌基因同源物(HRAS)
化妝品 4-羥基甲甲酯、氧基乙、 4-羥基甲酯活化復(fù)制因子1Anti-BRI3BP AntibodyVGF神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)
樺剝管孔菌神經(jīng)肽SAnti-BRI3BP AntibodyV-Fos-FBJ骨肉瘤病癌基因同源物(FOS)
果生鏈核盤菌神經(jīng)激肽B(抗原)Anti-BRS3 AntibodyVezatin蛋白(VEZT)
梨生囊殼孢菌活化復(fù)制因子2(多肽)Anti-BSX AntibodyVertnin蛋白(VRTN)
馬爾他布魯氏菌磷化活化復(fù)制因子2抗原Anti-BRWD3 AntibodyVEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)
太平洋棲海洋菌神經(jīng)激肽-B受體(抗原)Anti-BTBD6 AntibodyVav3癌基因(VAV3)
扇形平菇、扁形平菇活化轉(zhuǎn)錄因子3抗原Anti-BRSK1 AntibodyVav2癌基因(VAV2)
原鈣粘附蛋白11Y抗體變綠粘球菌大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞
原鈣粘附蛋白17抗體Stigmatellaerecta小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞
原鈣粘附蛋白1抗體類干酪乳桿菌人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞
原鈣粘附蛋白18抗體凝結(jié)芽孢桿菌人雪旺細(xì)胞
TNKS2抑制劑(NVP-TNKS656)匿名曲霉 甘露低聚糖
單色迷宮 蘋果多
球形節(jié)桿 氧化型輔Ⅱ單鈉鹽
噬甲基桿* 魔芋膠
沙福芽孢桿 1-氨基環(huán)烷羧酸
乳酸乳球乳亞種 無水乙酸鈉
枯草芽孢桿 乳糖
釀酒酵母 異麥芽酮糖
光神農(nóng)球 阿伯半乳聚糖
粉肉擬層孔 膽酸
白靈側(cè)耳 D-a-氨基己二酸
蒼白鹽八疊球 豬膽鹽
熱帶假絲酵母 蔗糖脂肪酸酯
蠟樣芽孢桿 鹽酸柔紅霉
大腸埃希 磺甲氧噠