公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CaMKII高效抑制劑(CaMKII-IN-1)
英文名稱:CaMKII-IN-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
CaMKII-IN-1是CaMKII高效選擇性抑制劑,IC50值為63nM,對(duì)CaMKIV,MLCK,p38a,Akt1,和PKC幾乎無作用。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1208123-85-6 純度:98.09% 分子量:548.1 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
漏斗狀側(cè)耳(鳳尾菇)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白125抗體Human DPYD(Dihydropyrimidine Dehydrogenase) ELISA Kit人免疫抑制性糖蛋白免疫試劑盒
貝爾氏菌屬卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體Human DSE(Dermatan Sulfate Epimerase) ELISA Kit人免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)免疫試劑盒
類黃假單胞菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白90A抗體Human DPT(Dermatopontin) ELISA Kit人免疫球蛋白重鏈(IgH)免疫試劑盒
葡萄座腔菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白71抗體Human DPP6(Dipeptidyl Peptidase VI) ELISA Kit人免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)免疫試劑盒
粗糙脈孢菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體Human DPYD(Dihydropyrimidine Dehydrogenase) ELISA Kit人免疫球蛋白輕鏈kappa(κ-IgLC)免疫試劑盒
喜堿運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體Human DSE(Dermatan Sulfate Epimerase) ELISA Kit人免疫球蛋白結(jié)合蛋白(BIP)免疫試劑盒
蠟樣狀芽孢桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體Human DSP(Desmoplakin) ELISA Kit人免疫球蛋白γ-1 鏈C 區(qū)(IGHGI)免疫試劑盒
豬放線桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白58抗體Human DR-70TM(Tumor Marker DR-70 For Lung Cancer) ELISA Kit人免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒
膜醭畢赤酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白94抗體Human CX43(Connexin 43) ELISA Kit人免疫球蛋白j鏈(Ig-j)免疫試劑盒
蘇云金芽胞桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白82抗體Human DBP/DNA Binding Protein(DNA Binding Protein) ELISA Kit人免疫球蛋白G4(IgG4)免疫試劑盒
羊肚伴生菌CDK5激活結(jié)合蛋白2抗體Human EAR2(Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 2) ELISA Kit人免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒
黃棕色鏈霉菌CDK2相互作用蛋白抗體Human Dyn(Big Dynorphin) ELISA Kit人免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)免疫試劑盒
德爾布有孢酵母周期蛋白依賴性激14抗體Human CYSLTR2(Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)免疫試劑盒
乳桿菌癌胚抗原相關(guān)粘附分子19抗體Human CSF2Rβ(Colony Stimulating Factor 2 Receptor Beta) ELISA Kit人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)免疫試劑盒
扭曲毛殼先天性紅生成異常性貧血蛋白1抗體Human DGAT1(Diacylglycerol O-acyltransferase 1) ELISA Kit人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)免疫試劑盒
*蛹蟲草癌胚抗原相關(guān)粘附分子16抗體Human CSNK2A2(Casein Kinase 2, alpha 2 Polypeptide) ELISA Kit人免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒
鼠傷寒沙門氏菌Salmonella│typhimurium 質(zhì)量規(guī)格:D,99.9%Adropin試劑盒穿琥寧
磚紅色微桿菌Microbacterium│testaceum 質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%, acidity 90% IN D2O ADP-核糖基化因子5試劑盒白果雙黃
阿爾及利亞擬盤多毛孢Pestalotiopsis│algeriensis 質(zhì)量規(guī)格:D, 99%, acidity 96-98% IN D2O ADP-核糖基化因子4試劑盒3-表熊果
CaMKII高效抑制劑(CaMKII-IN-1)粘蛋白/粘液1(MUC1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:MUC1 ELISA Kit血管生成相關(guān)蛋白6抗體包裝1g
再生基因蛋白1a(REG-1a)檢測(cè)試劑盒英文名稱:REG-1a ELISA KitMuellerian繆勒管抑制因子抗體包裝5g
載脂蛋白H(Apo-H)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Apo-H ELISA Kit酪蛋白激受體A8抗體包裝1g
載脂蛋白E(Apo-E)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Apo-E ELISA Kit脂肪酰家族成員1抗體包裝5g
載脂蛋白B48(apo-B48)檢測(cè)試劑盒英文名稱:apo-B48 ELISA Kit芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體包裝100mg
載脂蛋白B100(apo-B100)檢測(cè)試劑盒英文名稱:apo-B100 ELISA Kit磷化芳香N-乙?;D(zhuǎn)移抗體包裝1g
載脂蛋白B100(Apo B100)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Apo B100 ELISA Kit肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝500mg
載脂蛋白B(ApoB)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ApoB ELISA Kit粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝5g
載脂蛋白A5(apo-A5)檢測(cè)試劑盒英文名稱:apo-A5 ELISA Kit肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白DOC6抗體包裝100mg
載脂蛋白A1(apo-A1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:apo-A1 ELISA KitAFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白28抗體包裝500mg
載脂蛋白A1(Apo A1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Apo A1 ELISA Kit激活受體相互作用蛋白1抗體包裝1g
孕受體(PROGR)檢測(cè)試劑盒英文名稱:PROGR ELISA Kit固類還原家族7成員A2抗體包裝5g
孕(PROG)檢測(cè)試劑盒英文名稱:PROG ELISA Kit蛋白激AKT1,2,3抗體包裝25g
孕/孕(PROG)檢測(cè)試劑盒英文名稱:PROG ELISA Kit帕金森病相關(guān)蛋白ATP13A2抗體包裝5g
誘導(dǎo)型一氧化合成(iNOS)檢測(cè)試劑盒英文名稱:iNOS ELISA Kit肌側(cè)索硬化蛋白2抗體包裝100g